目的:研究经皮穴位电刺激（TEAS）对血管性痴呆（VD）大鼠模型认知能力的影响及其作用机制,观察线粒体自噬的发生过程是否参与调控VD大鼠模型的学习和记忆能力,阐明PINK1/Parkin通路是否通过介导线粒体自噬以改善VD大鼠模型的认知功能。方法:第一部分实验方法1.通过改良两血管阻断（2-VO）法构建VD大鼠模型,从神经行为学的角度,包括旷场实验和新物体识别实验,观察Sham组和2-VO组大鼠的学习和记忆功能。2.采用RNA-Seq技术,从生物信息学的角度,筛选Sham组和2-VO组海马组织的差异表达基因（DEGs）,并对DEGs的主要功能和富集通路进行分析。3.通过应用qRT-PCR实验检测Sham组和2-VO组的关键基因表达情况,验证RNA-Seq结果。第二部分实验方法1.应用TEAS对VD大鼠模型进行干预,通过新物体识别实验、Y迷宫和Morris水迷宫实验观察各组大鼠的自发运动行为和学习记忆能力。2.制备VD大鼠模型后进行TEAS治疗,通过免疫荧光实验检测各组大鼠自噬标志物LC3的表达情况。3.采用Western Blot实验检测TEAS处理后的VD大鼠模型中PINK1、Parkin、LC3-I、LC3-II和p62蛋白的表达水平。结果:第一部分实验结果1.在旷场实验中,与Sham组比较,2-VO组大鼠的自发运动减少,对新异环境的探索动机降低。在新物体识别实验中,与Sham组比较,2-VO组大鼠表现为记忆缺失。2.RNA-Seq共筛选195个DEGs,其中上调基因58个,下调基因137个。GO功能注释结果表明,DEGs主要参与神经生物学调节,负责结合和促进蛋白酶活动。KEGG通路富集结果显示,DEGs主要富集于Erb B、PI3K-Akt等通路。3.qRT-PCR实验结果显示,与Sham组相比,2-VO组Tgfα、Erb B3、Gab1、Cdkn1a、Creb5、Fgfr2和Col9a3的m RNA表达水平显著降低,而Alox15、Pdzd2和Hes5的m RNA表达水平显著升高。第二部分实验结果1.在新物体识别实验中,TEAS组大鼠探索新物体的时间多于Model组,T+3-MA组和Model组大鼠表现类似,出现学习记忆下降。在Y迷宫实验中,TEAS可增强VD大鼠的工作记忆能力。在Morris水迷宫实验中,TEAS促进VD大鼠的空间记忆能力。2.免疫荧光实验结果显示,与Model组比较,TEAS组海马区LC3表达增加;与TEAS组比较,T+3-MA组LC3表达减少。证明TEAS促进VD大鼠线粒体自噬发生。3.Western Blot实验结果显示,TEAS上调VD大鼠的PINK1、Parkin和LC3-II的表达水平,下调LC3-I和p62的表达水平。但T+3-MA组与TEAS组呈现相反趋势。结论:本研究证实改良2-VO法制备的VD大鼠模型确实存在学习和记忆功能障碍,并且应用TEAS治疗此VD大鼠模型后可改善其认知功能障碍。具体作用机制是TEAS通过上调PINK1/Parkin的表达,介导线粒体自噬发生,清除受损的线粒体,改善海马神经元环境,提高VD大鼠的认知功能。