目的:在临床实践中,扶元荣骨汤治疗原发性膝骨关节炎(以下简称膝骨关节炎)在改善症状,尤其是疼痛上取得了良好的疗效,明显提高了患者的生活质量。本研究拟通过临床和实验两种方法分别观察扶元荣骨汤:1、对膝骨关节炎(KOA)患者关节液中主要的促炎性细胞因子白介素-1(IL-1)和抗氧自由基、保护关节软骨、促进软骨修复的超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响,以及治疗前后的膝骨关节炎严重性指数(ISOA)的评分变化;2、对家兔膝骨关节炎模型关节液中白介素-1(IL-1)和血清中超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响,来揭示其作用机理,为开发中药新的方药和临床推广应用提供依据。方法:本课题分临床研究和实验研究(一)实验研究1、实验动物:健康6-8月龄、体重3000g±100g新西兰白兔37只,雌雄不分,由石家庄鹿泉实验动物饲养场提供。2、动物分组:按组间均衡一致的原则,将实验动物随机分为正常组(N组)8只,模型对照组(M组)8只,扶元荣骨汤组(F组)8只,布洛芬组(P组)8只,余5只随机取做病理和候补备用。3、模型制作:按日本鬼头康彦等的造模方法,在兔双后腿膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成膝骨关节炎模型,首次注入4℃、1.6%的木瓜蛋白酶生理盐水溶液2ml,后隔三天注射一次,共注射两次,每次1ml。4、操作方法:用灌胃器将扶元荣骨汤药液注入动物胃中,每日两次,每次100ml,15天为一疗程,共两疗程。5、检测指标:用药前中后的血清SOD和关节液IL-1的含量,以及光镜下关节软骨病理形态学变化。6、数据处理:实验数据用SAS软件进行统计学分析。(二)临床研究1、方药组成及制备:扶元荣骨汤以培元固本、生津荣骨为治疗法则,由熟地30g、肉苁蓉20g、黄芪30g、当归20g、党参10g、茯苓10g、制附子15g、麻黄9g、黄连10g、怀牛膝15g组成。采购于河北省中医院,由其制剂室韩国煎药机制备,每付药装两袋,每袋约100ml。2、受试对象:共120例,为河北省中医院骨科2005年11月—2007年2月的门诊和住院病例,女性73例,男性47例,年龄46-75岁,平均年龄61岁,均按照美国风湿病协会推荐的OA诊断标准和已有报道的最新临床表现标准,来确定入选受试对象。全部病例均排除:⑴风湿性关节炎⑵治疗前2周内使用过消炎镇痛药或糖皮质激素⑶肝肾功能不全、严重心脑疾病患者⑷药物过敏史者⑸继发性膝骨关节炎⑹孕妇、哺乳期妇女。3、病例分组:按随机原则将病人分为扶元荣骨汤组(F组)60例,布洛芬组(P组)60例。4、操作方法:F组口服扶元荣骨汤,每日两次,每次100ml,P组口服布洛芬,每日三次,每次0.3g。15天为一疗程,共两疗程,治疗期间禁用任何其他治疗骨性关节炎的中西药物,但病人治疗期间需加强患肢的功能锻炼。5、检测指标:用药前中后关节液的SOD、IL-1含量和ISOA积分。6、数据处理:实验数据用SAS软件进行统计学分析。结果(一)实验研究1、用药前:N、M、F、P组血清SOD、关节液IL-1浓度数据经完全随机设计的方差分析结果显示,按а=0.05水准,P<0.05,有统计学显著性差异;继做SNK-q检验显示,N组与M、F、P组比较,按а=0.05水准,P<0.05,有统计学显著性差异,M、F、P组之间比较,按а=0.05水准,P>0.05,无统计学显著性差异,这说明造模成功。2、一个疗程后:N、M、F、P组血清SOD、关节液IL-1浓度数据再经方差分析结果显示,按а=0.05水准,P<0.05,有统计学显著性差异;继做SNK-q检验显示,N组与M、F、P组比较,按а=0.05水准,P<0.05,有统计学显著性差异,M组与F组比较,按а=0.05水准,P<0.05,有统计学显著性差异,M组与P组,按а=0.05水准,血清SOD浓度数据比较P>0.05,无统计学显著性差异,关节液IL-1浓度数据比较P<0.05,有统计学显著性差异,F组与P组,按а=0.05水准,血清SOD浓度数据比较P<0.05,有统计学显著性差异,关节液IL-1浓度数据比较P>0.05,无统计学显著性差异。3、两个疗程后:方差分析及SNK-q检验结果显示同一个疗程后。4、用药前中后之间做纵向完全随机设计的方差分析,N、M组按а=0.05水准,P>0.05,无统计学显著性差异;F组按а=0.05水准,P<0.05,有统计学显著性差异,继做SNK-q检验显示两两之间均有统计学显著性差异;P组按а=0.05水准,血清SOD浓度数据比较P>0.05,无统计学显著性差异,关节液IL-1浓度数据比较P<0.05,有统计学显著性差异,继做SNK-q检验显示两两之间均有统计学显著性差异。5、用药前中后光镜下关节软骨病理形态学有显著变化。(二)临床研究1、用药前中后做纵向比较:关节液SOD、IL-1浓度数据经完全随机设计的方差分析结果显示,按а=0.05水准,F组P<0.05,有统计学显著性差异,继做SNK-q检验显示两两之间均有统计学显著性差异;P组SOD浓度数据比较P>0.05,无统计学显著性差异,IL-1浓度数据比较结果同F组。2、用药前中后做横向比较:F、P组做成组t检验结果显示,按а=0.05水准,用药前P>0.05,无统计学显著性差异;一个疗程后,IL-1浓度数据比较P>0.05,无统计学显著性差异,SOD浓度数据比较P<0.05,有统计学显著性差异;两个疗程后比较结果同前。3、F组治疗前与两个疗程后ISOA积分经多元线性回归分析结果显示,扶元荣骨汤治疗前后疼痛评分变化与X线诊断分级、体重为负相关,也就是说X线诊断分级越小或体重越轻,则治疗前后疼痛评分变化越大;X线诊断分级对疼痛评分变化的影响要大于体重的影响。结论1、扶元荣骨汤与布洛芬在降低关节液IL-1水平,缓解关节疼痛方面,无显著性差异,均有良好效果;在提高家兔血清和患者膝关节液SOD水平方面前者明显优于后者。说明扶元荣骨汤不仅能抗炎、缓解关节疼痛,而且有营养和保护关节软骨、提高软骨细胞功能、促进软骨修复、延缓软骨退变的良好作用;同时也说明扶元荣骨汤在近期疗效上与布洛芬无显著性差异,但在远期疗效上要优于布洛芬。2、关节及血清内过多的氧自由基可促进关节软骨的分解,加快关节软骨破坏和退变,而SOD正是其克星,可消除关节和血清中过多的氧自由基,提高抗氧自由基系统的能力,延缓软骨退变,营养和保护关节软骨、促进软骨修复等。扶元荣骨汤在实验与临床中显著提高了SOD水平,充分说明“培元固本、生津荣骨”的治疗原则是切实可行的。3、扶元荣骨汤的治疗效果与X线诊断分级、体重的相关性,说明扶元荣骨汤对膝骨关节炎早、中期,X线诊断分级为1-3级者有良好疗效,对于X线诊断分级为4级者治疗效果相对较差。同时也说明体重对膝骨关节炎的治疗效果有一定影响,适当控制体重可提高疗效。