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目的 探讨AntagomiR-21在大鼠椎间盘退变模型中的作用,为椎间盘退变及相关疾病的进一步研究及治疗提供参考。方法(1).一共选择60只12月龄的雌性SD大鼠(150-200 g)。大鼠随机分为四组,每组15只。正常对照组接受背部皮肤切开缝合。其他三个组的大鼠进行了外科手术,以诱导腰椎间盘退变。(2).大鼠椎间盘退变诱导方法:以10%的水合氯醛,腹腔内注射麻醉(0.5ml/100g),取俯卧位,固定大鼠前后四肢,背部脊周备皮,常规消毒铺单,沿背部棘突做后正中切口,逐层切开皮肤及皮下组织后,沿骨膜下剥离,咬骨钳咬除以L3为中心的L1-S1棘突、小关节突,剪断棘上、棘间韧带,部分切除、切断双侧脊旁肌肉,然后依层缝合皮下组织,关闭切口皮肤。术后一共饲养8周。(3).模型对照组大鼠予以尾静脉注射正常生理盐水;干预组大鼠予以尾静脉注射对照寡核苷酸;antagomiR-21组大鼠予以尾静脉注射antagomiR-21。一共注射8周。之后,大鼠腰椎及相应椎间盘,均被完整手术取出。髓核和纤维环进行免疫组织化学分析测定HIF-1α和VEGF的表达。腰椎间盘蛋白多糖的测定使用间苯三酚法。TUNEL染色观察腰椎间盘细胞凋亡情况。结果(1)AntagomiR-21治疗能减少HIF-1α在髓核和纤维环的表达。在模型组和干预组中,可以看见HIF-1α在细胞核和细胞质呈阳性染色(棕色和黄色)。和正常对照组相比,模型组和干预组髓核和纤维环HIF-1α的表达显著增加;与模型组和干预组相比,antagomiR-21组HIF-1α的表达显著减少。(2)AntagomiR-21能减少髓核和纤维环VEGF的表达。VEGF的表达在细胞质中主要呈阳性染色(棕色和黄色),与HIF-1α的表达相似。与正常对照组相比,模型组和干预组的VEGF表达显著增加;与模型组和干预组相比,antagomiR-21组VEGF表达显著降低。(3)AntagomiR-21能增加腰椎蛋白多糖含量。与正常对照组相比,模型组和干预组蛋白多糖含量明显降低;与模型组和干预组相比,AntagomiR-21组腰椎的蛋白多糖含量明显增加。(4)AntagomiR-21能够抑制腰椎细胞凋亡。与正常对照组相比,模型组和干预组中tunel染色阳性细胞的数量显著增加;与模型组和干预组相比,AntagomiR-21治疗显著降低了 tunel阳性细胞的数量。结论AntagomiR-21通过抑制Mir-21的表达,调控髓核和纤维环VEGF、HIF-1α的表达,间接减少局部血管生成,同时增加腰椎蛋白多糖的含量及减少细胞凋亡,在治疗大鼠椎间盘退变模型中发挥了保护作用,可为椎间盘相关疾病的进一步研究提供依据。