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二穗短柄草是禾本科植物基因组学和生物学研究的新型模式植物。随着二倍体短柄草Bd21基因组测序的完成大大促进了短柄草成为模式植物的进程。但二穗短柄草的转基因研究仍较为薄弱。农杆菌介导法是最主要的植物转化方法，具有转化效率高、转移片段明确、整合拷贝数低等特点。本研究致力于建立农杆菌介导的二穗短柄草遗传转化体系的建立，并优化转化过程。比较了1/2MS和MSB+MSB3培养基对农杆菌侵染的转化效率的影响，结果表明，具有MSB+MSB3培养基更有利于提高转化效率。此外，通过比较筛选结束后不同的分化时间对根系生长的影响，发现筛选后进行一周的分化更有利于后续根系的生长，将生根效率从50％提高至90％左右。本研究建立了较为高效的农杆菌介导的二穗短柄草Bd21的遗传转化体系，为短柄草基因工程的研究奠定了良好的基础。