股骨颈骨折是现在骨科临床上一种较为常见的骨折。由于股骨颈特殊的解剖结构,在其骨折后,沿着股骨颈走行的血管遭到破坏,造成股骨头缺血,进而形成股骨头坏死,有文献报道股骨颈骨折继发股骨头坏死的发生为30％[1]。近年来随着组织工程技术的不断发展进步,为我们临床上预防和治疗股骨头坏死提供了一些新的思路。本课题以犬股骨颈骨折后股骨头缺血坏死为研究对象,结合组织工程与骨折内固定两种技术,通过中空钉-VEGF释放体系预防犬股骨颈骨折后股骨头坏死,为临床预防人股骨颈骨折后股骨头坏死进行初步地尝试以及探索性的实验研究。　　 实验目的　　 1.制备rhVEGF165/PLGA微球/纤维蛋白胶复合物,建立可注射性VEGF缓释体系,通过观察其微观结构以及复合物的释放规律,来探讨rhVEGF165/PLGA微球/纤维蛋白胶体系在临床上应用的可行性。　　 2.建立犬股骨颈骨折的动物实验模型,观察中空钉-VEGF缓释体系在预防犬股骨颈骨折后股骨头坏死方面的应用效果,为其临床应用进行初步地尝试以及探索性研究。　　 材料与方法：　　 1.采用复乳-溶剂挥发法制备rhVEGF165/PLGA载药微球,并在电镜下观察其形态及粒径分布情况。将rhVEGF165/PLGA载药微球与纤维蛋白胶复合,建立可注射VEGF缓释体系,采用ELISA法测定微球的载药率、包封率及药物体外释放情况。　　 2.选用健康成年杂种犬9只,左后肢作为实验组,右后肢作为对照组,实验组应用中空钉-VEGF缓释体系,对照组只做单纯中空钉内固定,于股骨颈基底部凿断股骨颈,建立股骨颈基底部骨折模型,实验动物分别在3、6、9周处死取材,通过X线、同位素骨扫描、大体组织检查等方法观察骨折愈合情况和股骨头内新生血管化程度,评估中空钉内固定复合可注射VEGF缓释载体预防股骨颈骨折后股骨头坏死的效果及可行性。　　 1.通过复乳-溶剂挥发法制备载药微球粒径为76.64±16.13,um,载药率为(1.11±0.08)％。体外释放实验结果:rhVEGF165/PLGA微球在前3天爆发释放,释药量为26.19％,随后的3-42d呈持续缓慢释放,第42天时VEGF的释放量为96.37％。载药微球/纤维蛋白胶复合物第3天时,VEGF的释放量为21.56％,低于载药微球；第42天时,VEGF的释放量为88.07％,同样比载药微球在42天时的VEGF释放量要低。　　 2.X线检查结果:术后3周,实验组骨折线比对照组模糊,实验组股骨头密度高于对照组；术后6周,两组骨折已基本消失,股骨头密度接近；术后9周,两组骨折均愈合,股骨头密度相同。综合PET和组织学的检查结果:术后3周,实验组的股骨头内血管再生和坏死骨修复活跃,大量新生血管形成,而对照组明显低于实验组:术后6周,两组股骨头内血管再生和坏死骨修复接近完成,其速度开始下降,两组血管再生化程度接近；术后9周,两组股骨头内血管再生和坏死骨修复已基本停止,两组血管再生化程度几近一致。　　 结论　　 1.可注射VEGF/PLGA微球/纤维蛋白胶复合物具有良好的缓释效果,使药物作用时间延长到1个月,并能在缺血区形成凝块,维持局部较高药物浓度。　　 2.应用中空钉-VEGF释放体系预防股骨颈骨折后股骨头坏死的思路是可行的。该体系在完成骨折端坚强内固定的基础上,通过向股骨头内注入血管内皮生长因子,促进头内血管再生,改善头内血供,对早期预防骨折后股骨头坏死确实起到了一定的作用。本课题为该系的临床应用提供了实验参考依据。