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目的:通过观察促甲状腺激素受体(TSHR)基因敲除小鼠的骨生物力学、形态计量学变化及不同剂量的促甲状腺激素(TSH)对破骨细胞分化和相关基因表达的影响,研究TSH对骨代谢的影响并初步探讨其作用机制。方法:取Tshr-/-基因型雄性小鼠20只,随机分为2组,每组10只,其中一组断乳后给予饮食添加甲状腺素替代治疗,使其体内甲状腺素水平正常;另一组给予普通饮食喂养,不进行替代治疗;另匹配Tshr+/-和Tshr+/+两种基因型雄性小鼠各10只,普通饮食喂养。所有小鼠共同于屏障环境中饲养。8周龄时摘眼球取血处死小鼠,离心收集血清并取双侧股骨。右侧股骨行三点弯曲实验,测定弹性载荷、最大载荷、弹性模量和最大弯曲应力等指标,并分别测定股骨干重与灰重,计算灰重/干重。左侧股骨固定后逐级脱水,包埋于半聚合的甲基丙烯酸丁/甲酯中。聚合后采用重型硬组织切骨机,切不脱钙切片3张,分别进行von Kossa及Giemsa染色,光镜下进行观察与测量。采用MPIAS-2000彩色病理图像仪、同济医科大学清平影像公司软件进行骨体积、类骨表面、类骨质宽、成骨表面和破骨表面5个骨组织形态计量学参数测定。另外,使用核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导体外培养的小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞,通过不同剂量TSH处理,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法进行破骨细胞鉴定并计数,实时荧光定量PCR方法和细胞免疫荧光法检测各不同处理组之间,破骨细胞表型基因及功能基因TRAP、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织蛋白酶K(CTSK)的表达水平的差异,进一步研究TSH对该细胞系分化为破骨样细胞过程的影响。结果:1.与Tshr+/+组小鼠相比,股骨三点弯曲实验显示Tsh-/-和Tshr+/-组小鼠股骨弹性载荷(Fp)、最大载荷(Fb)、弹牲模量和最大弯曲应力均显著降低,甲状腺素替代治疗的Tshr-/-组小鼠仅弹性模量稍有升高,但与未替代治疗的Tshr-/-组小鼠比较,各指标差异无统计学意义;2.与Tshr+/+组小鼠相比,Tshr-/-和Tshr+/-组小鼠股骨灰重干重比值降低,骨矿含量减少,甲状腺素替代治疗对小鼠股骨灰重干重比值变化的影响无统计学意义;3.与Tshr+/+组小鼠相比,股骨不脱钙切片显示Tshr-/-和Tshr+/-组小鼠股骨骨小梁体积(BV/TV).类骨质表面(OS/BS)、类骨质宽(O.Th)、成骨细胞表面(Ob.S)均降低,而破骨细胞表面(Oc.S)显著增加;甲状腺素替代治疗后Tshr-/-组小鼠OS/BS、O.Th、Oc.S均显著增加;4.小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞诱导形成的破骨样细胞细胞膜存在TSHR;5.不同浓度的TSH呈剂量依赖性地抑制破骨细胞分化,下调破骨细胞TRAP. MMP-9和CTSK的mRNA和蛋白表达水平。结论:TSH能够抑制破骨细胞的分化及功能,这可能是TSH抑制骨吸收,发挥维持骨量、骨结构和骨强度作用的部分机制。