【摘 要】
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[目的]采用瘦素受体基因突变的db/db小鼠非酒精性脂肪肝动物模型,从动物、组织及蛋白层面研究人参皂苷肠道细菌代谢产物Compound K是否对db/db小鼠肝组织中脂肪代谢的调控作用。[方法]8周的BKS小鼠6只,db/db小鼠12只。其中BKS小鼠作为正常对照组,模型组(瘦素受体基因突变的db/db肥胖小鼠)和治疗组(瘦素受体基因突变的db/db肥胖小鼠+人参皂苷Compound K处理)。三
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[目的]采用瘦素受体基因突变的db/db小鼠非酒精性脂肪肝动物模型,从动物、组织及蛋白层面研究人参皂苷肠道细菌代谢产物Compound K是否对db/db小鼠肝组织中脂肪代谢的调控作用。[方法]8周的BKS小鼠6只,db/db小鼠12只。其中BKS小鼠作为正常对照组,模型组(瘦素受体基因突变的db/db肥胖小鼠)和治疗组(瘦素受体基因突变的db/db肥胖小鼠+人参皂苷Compound K处理)。三组动物给与正常饮食,治疗组小鼠以20mg/kg剂量人参皂苷Compound K溶液每天进行定时定量地灌胃。通过实验收集小鼠食物摄入量、体重、肝重;采用断尾取血,用电子血糖测量仪测定db/db小鼠禁食12h后的空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG);采用油红O染色及HE染色观测小鼠肝脏的脂肪沉积及病理改变;采用ELISA方法检测肝组织甘油三酯含量,采用蛋白质印迹法(Western blot,WB)检测肝组织中的GRK-2、mTOR、SIRT-3、AMPK蛋白及下游脂代谢相关蛋白的活性变化。[结果]通过使用瘦素受体基因突变构建的db/db小鼠脂肪肝模型进行实验并收集实验数据,得到以下结果:①人参皂苷CK能抑制db/db脂肪肝小鼠的食欲、降低体重、肝重、空腹血糖(FBG)和肝脏甘油三酯含量;②人参皂苷CK减少肝内脂肪沉积及脂肪空泡的形成,抑制脂肪肝发展;③蛋白层面显示:人参皂苷CK抑制GRK-2和mTOR,同时激活SIRT-3蛋白,最终激活AMPK,上调CYPT7A1、AOX-1蛋白以及抑制SREBP-1蛋白水平表达。[结论]①20mg/kg的人参皂苷Compound K能改善瘦素受体基因突变的db/db小鼠肥胖,延缓db/db小鼠非酒精性脂肪肝。②人参皂苷Compound K可能通过调控GRK-2、mTOR和SIRT-3蛋白的表达从而激活AMPK及调控下游脂肪代谢相关蛋白的表达,进一步抑制db/db小鼠的肝脏甘油三酯的积累。
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