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昆虫共生菌可促进昆虫的许多重要生物学功能,也可影响昆虫的繁殖力;其一个主要生理功能是提高免疫反应和外源解毒的能力而这两个因素都可以直接影响生物和化学防治策略。红火蚁Solenopsis invicta Buren是世界性害虫,对入侵地农林业生产,人畜安全,公共设施以及生物多样性等造成了严重危害。红火蚁在入侵的过程中直接或间接对入侵地土壤微生物多样性造成影响。本研究采用高通量测序技术对红火蚁巢穴土壤细菌群落多样性进行研究,并对整个土壤细菌群落进行毒液处理后比较群落多样性与丰富度变化;同时在巢穴土壤细菌纯培养的基础上对菌株进行毒液抑菌测试。明确巢穴土壤细菌群落组成,红火蚁毒液对细菌群落多样性的影响以及分离菌株对毒液的敏感性。研究结果如下:1、红火蚁巢穴土壤细菌群落多样性研究:提取巢穴土壤与巢外对照土壤的总DNA,对细菌16S r DNA的V3-V4区域进行PCR扩增,扩增产物进行序列分析。分析结果表明,蚁巢土壤中的细菌群落多样性和丰富度要高于对照土,蚁巢土壤相对较湿润,酸性较强。蚁巢土与对照土的优势菌门相似,均为变性菌门(33.59%～34.65%),绿弯菌门(19.41%～21.12%),酸杆菌门(13.16%～15.86%)和放线菌门(11.26%～14.78%);在5%差异显著水平上,蚁巢土壤中拟杆菌门的相对丰度显著高于巢外对照土壤;在1%差异显著差异水平上,对照土壤中的迷踪菌门的相对丰度显著高于蚁巢土;另外对照土中菌门Microgrnomates,菌门Ignavibacteriae,菌门Peregrinibacteria,菌门Gracilibacteria和菌门RBG＿1＿Zixibacteria的相对丰度显著高于蚁巢土。在属水平上,优势菌属为Acidobacteria,亚优势菌属为Anaerolineae。在1%显著水平蚁巢土中Acidibacter,BIrii41,Mycobacterium的相对丰富度显著高于对照土。2、红火蚁毒液处理对巢外对照土壤细菌群落多样性的影响:实验结果表明毒液处理后土壤中细菌群落多样性降低且群落物种丰富度显著降低,在门分类水平,对照土壤中的优势菌门为变形菌门,亚优势菌门为绿弯菌门。厚壁菌门和GAL15在处理组中相对丰度显著高于对照组;Cyanobacteria和Ignavibacteriae在对照组中相对丰度显著高于处理组。220?g/m L毒液处理土壤后Ignavibacteriae消失。在属分类水平,优势菌属为Acidobacteria,亚优势菌属为Anaerolineae。对照组中Anaerolineaceae,Nitrosomonadaceae,Gemmatimonadaceae,Roseiflexus,Haliangium,Ardenticateni,Polycyclovorans的相对丰富度显著高于处理组。处理组中Xanthobacteraceae,Bacillus,Rhodobiaceae的相对丰度显著高于对照组。3、红火蚁毒液处理对巢穴土土壤细菌群落多样性的影响:实验结果表明毒液处理后土壤中细菌群落多样性降低且群落物种丰富度显著降低,在门分类水平上处理组与对照组土壤中优势菌门均为变形菌门,亚优势菌门为放线菌门。在不同浓度的红火蚁毒液处理下,土壤细菌群落门分类水平相对丰度变化大Chloroflexi,Firmicutes和WS2相对丰度具有显著差异性,且Chloroflexi和WS2的相对丰度随着毒液处理而显著降低,Firmicutes相对丰度在毒液处理后反而显著增加。Microgenomate、Cholorobia和Fibrobacteres对红火蚁毒液敏感,220?g/m L毒液处理土壤后消失。在属分类水平,处理组与对照组优势菌属均为Acidobacteria,亚优势菌属为Anaerolineae,对照组中厌氧绳菌属相对丰度显著高于毒液处理组。毒液处理后土壤中Enterobacter,Bacillus,Streptomyces,Lactococcus,Pantoea和KD4-96相对丰富度显著高于对照组。Enterobacter,Bacillus,Acidobacteria,Anaerolineaceae,Sphingomonas,Acinetobacte相对丰富度随着毒液浓度的增加而降低。4、蚁巢土壤分离培养细菌对红火蚁毒液的敏感性:实验结果表明毒液处理后土壤中细菌群落多样性降低且群落物种丰富度显著降低从红火蚁巢穴土壤分离培养鉴定出4个科5个属16个菌种;5个属包括芽胞杆菌科(Bacillaceae)下的赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus)和芽孢杆菌属(Bacillus)、微球菌科(Micrococaceae)下的口腔球菌属(Sinomonas);肠杆菌科(Enterobacteriaceae)下的肠杆菌属(Enterobacter)以及伯克氏菌科(Burkholderiaceae)下的伯克霍尔德菌属(Burkholderia)。用毒液处理16株菌株后,其中10个菌种的生长受到了抑制,但其余6株菌株表现出耐药性,不同浓度毒液处理下均可以正常生长。当毒液处理浓度与我们所测得土壤中存在的毒液浓度一致时,对10株菌种有一定的抑制效果,但差异不显著。随着毒液浓度升高,芽孢杆菌属(Bacillus)的菌株1-5的生长受到显著抑制。红火蚁毒液对赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus)的菌株1-3,芽孢杆菌属(Bacillus)的菌株1-2,肝肠菌科(Enterobacteriaceae)的菌株2-2、菌株2-4和菌株2-5,伯克霍尔德菌属(Burkholderia)的菌株4-1无抑制作用。