基于非靶向代谢组学研究黄龙病菌对砂糖橘的影响

来源 :仲恺农业工程学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tonghe135612
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柑橘黄龙病的广泛传播造成严重的经济损失,且其病原菌(CLas)目前无法实现实验室培养导致研究进展少见突破。柑橘木虱是黄龙病的唯一自然虫媒,本研究确定了柑橘木虱的一个带菌种群,并作为带菌虫媒侵染试验大棚中2年树龄的无菌砂糖橘苗,建立了一组带菌砂糖橘研究模型。从该模型中用绝对定量的方法筛选出携带黄龙病菌浓度为高、中、低的三组砂糖橘苗样品与一组健康对照的砂糖橘苗样品。用实时直接分析质谱法(DART-MS)快速提取四组样品质谱并通过组学方法初步分析,本研究中具体研究进展与结果总结如下:确定了一个带菌率为56.67%的柑橘木虱带菌种群,用套袋接种无菌砂糖橘苗的方法建立了带菌砂糖橘研究模型,发现砂糖橘苗从柑橘木虱中获菌的初步时间规律,其中最小潜伏期为22天,中位潜伏期为30天,持续保留期为46天。通过对带菌砂糖橘与无菌砂糖橘代谢组进行主成分聚类分析,发现带菌与无菌的组间有显著差异,且带低浓度黄龙病菌的样品与健康样品相较于高浓度和中浓度样品差异更显著;经过统计学筛选质谱在METLIN数据中比对出252个带菌样品与无菌样品的目标差异化合物;将差异化合物进行代谢通路匹配,初步鉴定出10个差异化合物,分别定位在6类代谢通路中;初步鉴定到的10个差异化合物为:植物鞘氨醇(Phytosphingosine)、螺菌黄质(Spirilloxanthin)、4-甲基-2-呋喃羧酸(4-alpha-Methlfecosterol)、表甾醇(Episterol)、雌酚酮(Estrone)、阿拉伯茶氨(D-Cathinone)、L-2-哌啶甲酸(L-Pipecolate)、N-Succinyl-L-glutamate、L-脯氨酸(L-Proline)、四氢生物喋呤(Tetrahydrobiopterin);匹配到的6类代谢通路分别是:酯类代谢、萜类化合物/聚酮化合物代谢、类固醇/类固醇激素合成异生生物降解与代谢、氨基酸代谢以及其他次生代谢产物的生物合成。本文的主要研究结果结论对生产实践和理论都具有重要意义,有助于剖析黄龙病的致病机理,也为标记化合物发展新型黄龙病诊断技术提供了可行性参考。
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