Syk(L)和异构体Syk(S)作为肝细胞癌复发转移标志物的研究

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背景与目的: 全长型的脾酪氨酸激酶(Spleen tyrosine kinase,Syk)也称为Syk(L),由于在转录过程中的选择性拼接,翻译产生一种在IDB功能域上较Syk(L)减少23个氨基酸的异构蛋白,称为Syk(S)。研究表明Syk两种同质异构体在生物学功能上有较大的差异。在多种肿瘤细胞中,Syk(L)过表达可以抑制细胞增殖、侵袭和迁徙能力等;Syk(S)由于缺失了核定位信号而不能进入到细胞核内,且正常组织中无表达,仅在肿瘤中特异性表达。Syk(L)和异构体Syk(S)在人肝细胞癌(下称肝癌)中尚未见报道,本研究探讨Syk两种异构体在肝癌中的表达及其对肝癌术后复发转移的预测价值。 方法: 采用RT-PCR和Westemblot方法检测7株人肝癌细胞系(MHCC-97H、MHCC-97L、BEL7402、Huh7、PLC/PRF/5、Hep3B和Chang Liver)和1株正常人肝细胞系L02中Syk(L)和Syg(S)的mRNA和蛋白的表达。采用RT-PCR方法检测30例正常无肝硬化的肝血管瘤或FNH瘤旁肝组织中Syk(L)和Syk(S)mRNA的表达。回顾性分析2003年1月至2004年3月间经手术切除的132例肝癌患者资料,采用RT-PCR方法检测肝癌与匹配癌旁肝组织中Syk(L)和Syg(S)mRNA的表达,并结合Syk(L)和Syk(S)mRNA在肿瘤中的表达情况、16项临床病理资料和随访结果进行单因素和多因素预后分析。 结果: RT-PCR和Western blot两种方法检测结果一致。Syk(L)和Syk(S)在肝癌细胞系BEL7402中失表达,在其余6株肝癌细胞系和1株正常肝细胞系中均可检测到Syk(L)表达;Syk(S)仅在具有转移潜能的肝癌细胞系MHCC-97H和MHCC-97L中表达,而在无转移潜能的肝癌细胞系Huh7、PLC/PRF/5、Hep3B、Chang Liver和正常肝细胞系L02中无表达。30例正常无肝硬化肝组织中均可检测到Syk(L)mRNA表达,未检测到Syk(S)mRNA表达。Syk(L)和Syk(S)mRNA在肝癌组织中表达分别为84.9%(112/132)和31.8%(42/132)。多因素分析得出影响术后无瘤生存率的因素为:肿瘤直径(P=0.001)、卫星结节(P=0.031)、门静脉癌栓(P=0.012)和Syk(S)mRNA表达状态(P=0.000);影响术后总体生存率的因素为:术中肝硬化分级(P=0.019)、TNM分期(P=0.008)、Syk(L)mRNA表达状态(P=0.033)和Syk(S)mRNA表达状态(P=0.000)。肝癌中Syk(L)阴性表达或Syk(S)阴性表达的患者预后相对较差。Syk(L)mRNA阳性表达组1和3年无瘤生存率分别为48.1%和33.2%,Syk(L)mRNA阴性表达组1和3年无瘤生存率分别为25.0%和13.3%;Syk(L)mRNA阳性表达组1和3年总体生存率分别为73.2%和42.4%,Syk(L)mRNA阴性表达组1和3年总体生存率分别为36.9%和26.4%。相反,Syk(S)mRNA阳性表达组1和3年无瘤生存率分别为20.8%和9.7%,Syk(S)mRNA阴性表达组1和3年无瘤生存率分别为55.6%和39.9%:Syk(S)mRNA阳性表达组1和3年总体生存率分别为38.1%和15.5%,Syk(S)mRNA阴性表达组1和3年总体生存率分别为82.1%和51.3%。 结论: 本研究结果提示:肝癌中Syk(L)阳性表达是术后总体生存佳的独立预后因素,而Syk(S)gB性表达是术后无瘤生存和总体生存差的独立预后因素;Syk(L)可能在肝癌的发生发展中起负性调节作用,而Syk(S)可能与肝癌的复发转移相关;Syk(L)和Syk(S)可作为预测肝癌术后生存和复发转移的参考指标,为易复发的高风险患者选择及时、有益的术后辅助治疗提供指导。
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