促红细胞生成素对大鼠全脑缺血模型Caspase-9,RTP801mRNA表达的影响

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[目的]探讨大鼠全脑缺血模型在灌流不同时间点Caspase-9及RTP801mRNA的动态表达,促红细胞生成素(EPO)对Caspase-9,RTP801m RNA表达水平的影响,以及EPO对凋亡细胞数量的影响,讨论脑缺血时EPO的神经保护机制。 [材料和方法]66只大鼠随机分为缺血再灌组(n=30)、EPO治疗组(n=30)、对照组(n=6)3组。前两组采用4血管阻断法制作大鼠全脑缺血模型,并按照缺血后6h,12h,24h,48h,72h上述时间点随机分为5小组,每组6只大鼠,EPO治疗组在颈总动脉夹闭10min后立即给予EPO(4000U/kg/天)腹腔注射,6h,12h,24h组只在缺血后给予一次EPO腹腔注射,48h组共给予两次,72h组共给予三次同样剂量的EPO。缺血再灌注组、EPO治疗组均于各时间点处死。对照组不手术,每天只给予生理盐水1ml腹腔注射,于第三天处死。应用RT-PCR技术检测Caspase-9及RTP801mRNA的表达。产物DNA用凝胶分析系统采集图像并分析Caspase-9,RTP801的吸光度值。用原位细胞凋亡检测法(TUNEL)观察并计数海马CA1区TUNEL阳性细胞数。数据以均数±标准差的形式表示,缺血再灌组和EPO治疗组各时间点与对照组间比较采用单因素方差分析,缺血再灌组与EPO治疗组比较采用配对t检验,数据用SPSS11.5软件包做统计分析,检验水准α=0.05。 [结果] Caspase-9:缺血再灌注各时间点Caspase-9 mRNA和β-actin吸光度的比值与
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