宫颈癌是发展中国家中最常见的妇科恶性肿瘤。大量研究表明宫颈细胞学筛查降低了宫颈癌的发生率和死亡率。但是，发展中国家由于缺乏组织良好的普查计划，宫颈癌仍是导致妇女癌症死亡的第二大原因。目前认为HPV感染是宫颈癌发生的始动因素。流行病学调查和分子生物学研究表明，宫颈癌发生与高危型人乳头状瘤病毒(如HPV-16、HPV-18、HPV-31等)感染密切相关，在99.7％以上的宫颈癌及其前体病变(鳞状上皮内瘤变)中存在HPV DNA，并以HPV16最为常见，占50％。因此，HPV16已成为宫颈癌疫苗的主要靶标。除了感染因素，免疫抑制是宫颈癌发展的另一个重要因素。研究表明，在肾移植、HIV感染等免疫抑制的妇女，宫颈癌的危险性明显升高。 HPV不能进行常规的体外培养，高危型HPV引起的疾病是一个漫长的过程，并且HPV感染是非溶细胞性的，不能进行病毒体外中和实验，因此建立合适的动物模型有十分重要的意义。目前人类肿瘤的荷瘤动物模型研究较多的是移植瘤模型，以异种移植模型为主，移植方法包括组织块移植法、细胞种植法、肾包膜下移植法等。早期的宫颈癌动物模型采用正常鼠，成瘤率较低。目前应用较多的是人宫颈癌异种移植裸鼠肿瘤模型，但与人类自发宫颈癌的生物学特征尚有较大差距，另外，由于裸鼠仍具有体液免疫功能，不能进行免疫重建，不是研究HPV感染和宿主免疫关系的理想模型。严重联合免疫缺陷鼠——SCID鼠同时缺乏T细胞和B细胞，其应用价值远高于裸鼠。目前已有许多人类肿瘤移植到SCID小鼠的浙江大学硕士学位论文报道，并证实SCID小鼠比裸鼠更适合于众多人类肿瘤生长、转移的研究。同时，SCID小鼠可以用人类免疫细胞进行免疫功能重建，适合于在动物体内研究人类免疫细胞和人类肿瘤的关系，是理想的肿瘤及免疫功能重建的动物模型。 尽管己有许多用SCID鼠重建人体免疫系统和移植人类肿瘤成功的报道，但迄今尚未见国内外有关人免疫重建荷人宫颈癌SCID鼠移植模型的报道。我们的研究通过HPV16阳性SIHa细胞株皮下接种和人外周血淋巴细胞腹腔移植于SCID鼠，在国内外首次成功建立了免疫重建荷人HPV16阳性宫颈癌SCID鼠模型，同时观察其生物学特性和主要免疫学指标，为进一步研究HPV16阳性的宫颈癌免疫治疗尤其是疫苗研究提供有价值的动物模型。 材料与方法 将无免疫渗漏scID鼠(IgG<lmg.L一，)犯只随机分为4组，皮下接种PBss只作为空白组，腹腔注射hu一PBLS只作为人化组，皮下接种HPV16阳性SIHa细胞11只作为荷瘤组，腹腔注射hu一PBL进行免疫重建，24小时后皮下接种SIHa细胞11只作为人化荷瘤组。其中荷瘤组和人化荷瘤组再随机分为2组:一组6只鼠在第90天摘眼球取血处死检测免疫学指标，另一组5只鼠观察至自然死亡。 移植瘤生物学特征的观察:观察荷瘤鼠成瘤、一般特征、移植瘤生长和转移情况、生存时间、移植瘤大体和组织学特征。移植瘤原代培养并观察形态特征，用PCR法检测外周血、肿瘤组织和肝、脾、肺、肾、子宫、输卵管、卵巢、大网膜等其它组织中HPV16 DNA。主要免疫学指标检测:局部免疫反应—肿瘤组织HE染色和人CD4十免疫组化观察肿瘤组织中淋巴细胞浸润(TILS)情况。全身免疫反应:细胞免疫应答—SCID鼠死亡当天取脾脏和外周血，用流式细胞仪检测脾脏和外周血人CD3十、CD4+、COS十T细胞的水平;取脾脏用LDH释放法检测脾细胞毒杀伤功能;用ELlsA法检狈l外周血中人细胞因子IFN一水平。体液免疫应答—每隔5天断尾取血200川/只，连同处死后终末血采用磁酶免法测定小鼠血浆中人免疫球蛋白G含量;用ELISA法检测外周血中人细胞因子IL一4水平。同时检测移植物抗宿主情况、SCID鼠解剖当天称脾重。浙江大学硕士学位论文差异显著性检验采用t检验或秩和检验，显著性水准a=0.05(双侧)，所用操作均在SPSS n.0软件包内进行。 结果 生物学特性:荷瘤组和人化荷瘤组的成瘤潜伏期均为巧一18天，无显著差异，成瘤率均为100%;荷瘤鼠潜伏期后移植瘤缓慢生长，50天后瘤组织膨胀性生长，荷瘤组80天后移植瘤活动度下降或固定。人化荷瘤组移植瘤生长速度及移植后平均直径显著低于荷瘤组;大体检查原位移植瘤呈球状，切面灰白色，质硬，包膜完整。腹腔内未见腹水。大体和镜下未见肿瘤转移。荷瘤鼠肿瘤组织镜下表现呈鳞癌特征。荷瘤组平均生存期为(97.8士3.7)天，而人化荷瘤组的平均生存期(136.2土6.3)天，显著长于荷瘤组;各组外周血HPV16 DNA检出率均为O;所有瘤组织HPV16 DNA阳性，而肝、脾、肺、肾、子宫、附件、大网膜等组织HPV检测均为阴性;移植瘤原代培养细胞与siHa细胞系生长特性以及形态等相似。 主要免疫学指标检测结果:人化组SCID鼠100%可以检测到人lgG，30天内随重建时间的延长而升高，与未人化组比显著升高。人化荷瘤组显著高于人化组。第90天人化组仍可检测到lgG，与未人化组比较仍差异显著，但IgG水平已下降;空白组和荷瘤组外周血未检测到人细胞因子IFN一和IL一4。人化组和人化荷瘤组外周血中均检测到人IFN一丫和IL一4，但