黄芪多糖对大肠癌的抗癌作用及其与淋巴管生成的相关性研究

来源 :甘肃中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:passtestall
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目的:研究黄芪多糖体外对人结肠癌LOVO细胞、正常人淋巴管内皮HLEC细胞增殖能力的影响,以及对淋巴管内皮生长因子VEGF-C蛋白及mRNA表达的影响,探讨黄芪多糖对大肠癌的抗癌作用与淋巴管生成之间的关系。方法:分别用不同浓度黄芪多糖(0.5mg/ml、1mg/ml、1.5mg/ml、2mg/ml)与人结肠癌LOVO细胞株、正常人淋巴管内皮HLEC细胞株共培养,培养24h、48h、72h、96h后,用细胞增殖/毒性实验(CCK-8)检测人结肠癌LOVO细胞、正常人淋巴管内皮HLEC细胞活性及增殖能力的影响,研究黄芪多糖对两种细胞的作用及其最佳作用浓度和作用时间。免疫蛋白印迹(Western Blot)法检测黄芪多糖对人结肠癌LOVO细胞、正常人淋巴管内皮HLEC细胞VEGF-C蛋白表达的影响。逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测黄芪多糖对人结肠癌LOVO细胞、正常人淋巴管内皮HLEC细胞VEGF-C mRNA表达的影响。采用SPASS 21.0软件进行数据分析,以α=0.05为检验水准。结果:人结肠癌LOVO细胞经过与不同浓度黄芪多糖(0.5mg/ml、1mg/ml、1.5mg/ml、2mg/ml)处理24h、48h、72h、96h后,细胞活性及增殖水平均明显下降,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),且呈浓度和时间依赖性;而对正常人淋巴管内皮HLEC细胞的作用正好相反(P<0.05),而最佳作用浓度为1.5mg/ml,作用时间为48h。人结肠癌LOVO细胞经过不同浓度黄芪多糖处理48h后,VEGF-C蛋白的表达较对照组显著下降(P<0.05),且呈剂量依赖;对于正常人淋巴管内皮HLEC细胞,黄芪多糖浓度为2mg/ml时能够上调VEGF-C的表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),黄芪多糖浓度低于2mg/ml时,差异无显著性(P>0.05)。人结肠癌LOVO细胞经黄芪多糖处理后,VEGF-C mRNA表达呈现下降的趋势(P<0.05,呈时间和剂量依赖;正常人淋巴管内皮HLEC细胞经黄芪多糖处理后,黄芪多糖浓度低于1.5mg/ml,作用时间小于8h时,虽能增加VEGF-C mRNA的表达,但无显著性差异(P>0.05)。结论:黄芪多糖能抑制人结肠癌LOVO细胞的细胞活性和增殖,并呈剂量和时间依赖,而且能够下调VEGF-C的表达;一定浓度的黄芪多糖能够增强正常人淋巴管内皮HLEC细胞的活性。黄芪多糖对大肠癌的抗癌作用的原理可能与下调肿瘤细胞VEGF-C的表达,抑制淋巴管的生成有一定关系。
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