sGP130干预小鼠角膜新生血管作用机制的研究

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目的:探讨sGP130干预对小鼠角膜新生血管的影响及机制。方法:选择合适浓度的IL-6/s IL-6R对人脐带静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)进行诱导。使用sGP130药物干预,western blot、q PCR等实验手段观察蛋白水平及相关因子m RNA表达水平的变化,从而探讨其干预效果。用合适浓度的氢氧化钠构建小鼠角膜碱烧伤新生血管模型,使用sGP130眼药水等药物进行治疗,以氯霉素为阴性对照组,糖皮质激素为阳性对照,观察不同药物对于小鼠烧伤眼角膜的干预效果,使用western blot、q PCR等实验方法探讨治疗效果的机制,并对其分子机理进行探究。结果:1.IL-6/IL-6R联合使用会诱导HUVEC的p-STAT3蛋白的显著表达,IL-6单独使用不能诱导HUVEC的p-STAT3蛋白的显著表达。IL-6/IL-6R联合使用诱导HUVEC的p-STAT3具有时间依赖性,且可以被sGP130所抑制。2.IL-6/IL-6R联合使用会诱导HUVEC的细胞迁移,但是不能诱导HUVEC的细胞增殖,且可以被sGP130所抑制。3.IL-6/IL-6R联合使用会诱导HUVEC的MCP-1的m RNA表达量显著上升且具有时间依赖性。VCAM-1、ICAM-1、VEGF-A和IL-8的m RNA表达量具有类似的结果且可以被sGP130所抑制。5.小鼠角膜碱烧伤经过治疗后炎症反应轻,sGP130治疗组角膜透明度较其他组高,角膜新生血管程度较其它对照组轻。6.治疗后的角膜进行蛋白免疫印迹,第14天结果显示,sGP130组IL-6和VEGFA表达量明显低于同期对照组。第21天结果显示,各组VEGF-A没有显著差异。sGP130组角膜IL-6表达量略低于同期对照组。结论:本研究结果表明,sGP130对小鼠角膜碱烧伤起改善作用。其作用机理是通过抑制IL-6反式信号通路,从而下调VEGF-A等因子的表达,从而达到减轻小鼠角膜新生血管的效果。
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