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本论文以紫贻贝Mytilus edulis为原料,系统地研究了酶解液的制备、抗菌肽的分离纯化及其基本性质,并研究了粗分离抗菌肽在草莓保鲜、鲈鱼防腐方面的应用。本论文的研究内容包括以下4个部分:1.研究了不同蛋白酶酶解紫贻贝制备抗菌肽的工艺条件。以紫贻贝为原料,以酶解液抗菌活性为指标,通过单酶正交实验和复合酶解实验确定酶解液的最佳制备方案,即选择Alcalase蛋白酶和菠萝蛋白酶组成复合酶,水解工艺及条件为:在55℃,pH8.5下,采用Alcalase蛋白酶水解4h,加酶量300U/g,料水比1:3,然后调节pH至5.5,温度调节至50℃,加入菠萝蛋白酶,加酶量900U/g,酶解3h,料水比1:3。2.研究了紫贻贝酶解液中抗菌活性肽的分离纯化。先用Cellulose-52离子交换柱进行分离纯化,平衡液为20mmol/l醋酸缓冲液(pH4.5),流速为0.6ml/min,用0-1.0 mol/l NaCl溶液进行线性梯度洗脱,活性峰C3对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和溶壁微球菌的抑菌圈直径均超过10mm,活性峰收集后用Sephadex G-25凝胶柱分离,洗脱液为蒸馏水,流速为0.6ml/min,280nm检测,C3S1洗脱峰对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和溶壁微球菌的抑菌圈分别为13.2mm,10.0mm和14.43mm。收集活性峰,用反相高效液相色谱制备柱纯化,0-30min,0-40%乙睛梯度洗脱,流速0.8ml/min,柱温30℃,,检测波长225nm。活性峰C3S1H3对三种菌的抑制作用跟其他洗脱峰相比,存在显著性差异。收集后用反相高效液相色谱分析柱纯化和鉴定,两次洗脱条件是分别是:0-15min,乙腈0-30%,流速0.8ml/min,柱温30℃,检测波长225nm;洗脱峰A1抑菌活性。A1进一步用0-15min,乙腈0-20%,流速0.8ml/min,柱温30℃,检测波长225nm的条件进行纯化,活性峰A1A1最后经鉴定是一个单一峰,记为MAMP。3.研究了抗菌肽的基本性质。该抗菌肽具有较好的pH和温度稳定性,在60℃-80℃处理20min其抗菌活性基本没有变化。在pH6.0-8.0的近中性环境中,紫贻贝抗菌肽的抗菌活性最强。MIC在15.312-61.25μg/ml之间,对革兰氏阳性菌的抑制作用要大于对革兰氏阴性菌的抑制作用,具有较广的抗菌谱。分子量约为2490Da,经过液相纯化后的抗菌肽MAMP由12种氨基酸组成,含量较高的三种氨基酸分别是:丝氨酸13.57%,脯氨酸14.66%,半胱氨酸26.03%,其他9种氨基酸含量均在10%以下。4.研究了紫贻贝抗菌肽在草莓保鲜、鲈鱼防腐方面的应用。经壳聚糖包膜,山梨酸钾浸泡、抗菌肽浸泡过的草莓样品在同样的贮藏条件下感官指标、总酸含量、Vc含量要优于空白组。这表明壳聚糖,山梨酸钾,抗菌肽均对草莓有一定的保鲜作用,且三者的作用依次递减。通过对不同处理后的鲈鱼的感官指标、pH、T-VBN、细菌总数和K值的测定,结果显示壳聚糖,山梨酸钾,抗菌肽对鲈鱼均有一定的防腐作用,壳聚糖的作用较强,山梨酸钾和粗分离抗菌肽的作用相当。