可调光谱的离子选择性光极及其在生物检测中的应用

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离子检测具有重要的生理意义,目前主流的方法是离子选择性电极法,这一方法具有灵敏度高,重复性好等优点。但是也具有电极容易老化,检测限高,不利于仪器一体化的问题。荧光方法具有高灵敏度、检测迅速等优点,成为离子检测、细胞成像等方向的有利工具。目前最常用的是荧光探针的方法。在应用到生命分析中时,多目标物的测定需要有不同激发发射光谱的荧光探针,避免光谱重叠,影响测量,而设计合成不同的荧光探针费时费力,且它还具有易泄露、细胞毒性等问题。近十年来,离子选择性光极作为一种重要的光学传感器发展迅速。本论文具体展开了以下两方面的工作:  (1)将杯[4]芳烃修饰的氟硼荧染料(CBDP)作为荧光显色离子载体应用于离子选择光极中,制备戍氯离子、钠离子、钾离子和钙离子选择性光极。其对阴阳离子的响应原理分别基于共萃取机理和离子交换机理。这种光学传感器被用于血浆样品中这四种离子的测定,具有选择性高,可逆性好,响应快速的优点,在有干扰离子存在的条件下,仍然可以对目标离子有很好的响应。由于使用同一荧光显色离子载体,可以实现对复杂样品中多组分的高通量快速检测。兔血浆中四种电解质浓度由以上光极(optode)和传统的离子选择电极(ISE)法测得的结果接近,由此说明了这类光极应用于临床诊断方面的前景。  (2)将钙离子选择性光极微型化,制作成尺寸在70nm左右的钙离子选择性纳米传感球。通过选择CBDP和ETH5350这两种不同光学性质的显色离子载体,制备成可见光区和近红外光区的荧光传感纳米球,即可以实现可控光谱范围的荧光纳米传感球。这种纳米球对于钙离子的响应时间大约在1秒,能够对钙离子进行可逆的检测。且其生物毒性低,可以通过胞吞作用进入细胞,成功应用于细胞内钙离子的测量。与商用钙离子探针Fluo-3相比,纳米传感微球的细胞存留性更好,能在24小时后,仍旧对细胞内钙离子变化有响应,因此可以用于长时间细胞内钙离子水平检测。
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