宽筋藤抗类风湿性关节炎药效实验研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:jasonzhong414
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目的:对岭南常用中草药宽筋藤的镇痛、抗炎、抗类风湿性关节炎药效及其作用机制进行研究,为宽筋藤的临床应用和进一步开发提供实验依据。方法:主要分三大部分展开研究:(1)宽筋藤水提取物镇痛抗炎药效实验研究:采用冰醋酸刺激小鼠扭体实验和福尔马林小鼠致痛实验研究宽筋藤提取物对炎性刺激致痛疼痛的抑制效果;采用冰醋酸致小鼠腹腔毛细管通透性增加实验和二甲苯致耳肿胀实验研究宽筋藤对炎症刺激的抑制效果。同时测量和统计小鼠的体重增长量、胸腺系数、脾脏系数,观察宽筋藤水提取物对小鼠的消化系统和免疫系统的影响。(2)宽筋藤醇提取物抗RA药效实验研究:采用研磨乳化法制备弗氏完全佐剂(CFA),对大鼠足跖皮内注射CFA (0.1ml/只)致炎免疫制作佐剂类风湿性关节炎(AA)大鼠模型。第15天时筛选有继发性炎症反应的大鼠,分组并连续灌胃给药治疗20天(宽筋藤醇提取物各剂量组每天灌胃给药,甲氨蝶呤(MTX)组隔天灌胃一次)。观察宽筋藤醇提取物对AA大鼠体征变化、关节肿胀程度、关节病理、脾脏病理、细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α等指标的影响。(3)宽筋藤含药血清及宽筋藤提取物对MH7A细胞抑制作用的研究:用10倍等效剂量宽筋藤水提取物和宽筋藤醇提取物对大鼠连续灌胃给药3天,于末次给药1h后采血制备含药血清。配制不同浓度的含药血清培养基培养MH7A细胞24h、48h, MTT法测试细胞活性,探究含药血清对MH7A细胞的干预效果。结果:(1)宽筋藤水提取物能明显减少小鼠扭体次数(P<0.05),能显著减少福尔马林致痛第Ⅰ时相、第Ⅱ时相添足累计时间(P<0.05或P<0.01),对化学致炎性疼痛刺激有良好的抑制作用;能抑制冰醋酸致腹腔毛细管通透性增加所致炎症因子渗出(P<0.05或P<0.01),能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀(P<0.01);此外,宽筋藤水提取物灌胃对小鼠体重增长状况、胸腺系数、脾脏系数均无明显影响。(2)宽筋藤醇提取物对AA大鼠全身体征都有所改善,与模型组比较,给药治疗的AA大鼠体重增长量显平稳上升趋势(P<0.05):继发侧关节无显著统计学意义(P>0.05)但有消肿趋势;肿胀大小关节总数减少(P<0.05);血清细胞因子IL-1 β、IL-6、TNF-α的浓度有所降低,但无显著差异(P>0.05);踝关节病理、脾脏病理均有所改善,且评分结果有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(3)宽筋藤水提取物和宽筋藤醇提取物含药血清及宽筋藤提取物直接给药均对MH7A细胞增殖无明显抑制作用(P>0.05)。结论:宽筋藤水提取物有镇痛、抗炎、消肿的药效;宽筋藤乙醇提取物对AA大鼠关节炎治疗有一定效果,其作用机制可能是通过抑制TNF-α、IL-1β、IL-6等细胞因子,减少致炎性物质的释放,从而发挥镇痛抗炎效果:同时各类炎症因子下调改善关节滑膜的炎症反应抑制关节滑膜过度增长,缓解关节软骨坏死;且由于炎症因子下调使免疫器官应激反应缓和,脾脏病理组织得到改善:但宽筋藤提取物含药血清和对MH7A细胞增殖无直接抑制作用。
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