传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus, IBDV)是引起鸡传染性法氏囊病(infectious bursal disease, IBD)的病原体,主要侵害3～6周龄雏鸡中枢免疫器官-法氏囊,感染并诱导PreB细胞凋亡,引起严重的免疫抑制,导致免疫失败和对其它传染病易感性增加,对养鸡业造成重大损失。IBDV强毒株经过CEF或Vero细胞盲传数代,可获得适应细胞培养的致弱株,因此除了鸡的B淋巴细胞之外,CEF和Vero细胞也可能存在不同毒力的IBDV受体及感染相关的分子,介导病毒吸附,侵入等感染的重要过程。为了研究存在于原代鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblast, CEF)的IBDV受体等感染相关的分子,本研究首先构建了鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库,并建立了高效电转化感受态细胞E. coli strain DH10B制备方法用于文库的扩增。然后将biotin - streptavidin系统用于免疫组化建立了感染阳性细胞数减少试验的方法,用于筛选抑制IBDV感染CEF的单克隆抗体,采用全细胞免疫的方法制备了抑制IBDV感染CEF的单克隆抗体,其中最好的一株平均感染抑制率达到84.5%,且其感染抑制率具有剂量依赖性,另外通过流式细胞仪可以确定该mAb所针对的蛋白存在于CEF表面,由此推测该mAb所针对的蛋白在IBDV感染的过程中起核心作用,该蛋白极有可能就是IBDV受体成分之一,即使不是该病毒的受体也是该病毒感染相关的分子,由于该mAb并不能完全抑制IBDV感染,提示CEF表面还有其它受体的存在;该单克隆抗体的制备为克隆存在于CEF的IBDV受体等感染相关分子的基因,以及揭示IBDV感染机理奠定了基础。