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杨树是山东省乃至我国北方的一种四旁绿化、农田防护林和速生丰产用材林发展的主要树种,在我省经济、社会和生态环境保护方面均发挥着重要作用。随着杨树人工林栽植面积的不断扩大和品种单一化,杨树溃疡病发生十分严重,严重影响了山东省杨树人工林的健康持续发展。Botryosphaeria属真菌是引起杨树溃疡病的主要病原。为明确山东省杨树溃疡病菌种类多样性,本研究从病菌的培养学、形态学、分子生物学及致病性等方面开展研究。研究结果如下:1、实验对山东省16个地(市)的107、108、110欧美杨树溃疡病标本进行广泛采集、分离和纯化病菌,共采集标本78份,分离纯化后得到供试菌株52个。2、根据病菌菌落颜色、大小、气生菌丝茂密程度、色素和菌落边缘特征,52个供试菌株分为4个特征类型;根据病菌在PDA培养基上子实体特征,发现杨树溃疡病菌子实体多为黑色或灰白色,表生、半埋生或埋生,单生或聚生,多为球形或扁球形,个别菌株子实体为单生,其他供试菌株均为单生或者聚生。无性子实体可产生两种类型分生孢子:大型分生孢子和小型分生孢子,个别菌株两种孢子混生。供试菌株中Sdau18-40菌株的分生孢子棕色,Sdau07-159菌株分生孢子初为淡黄色,后变为浅棕褐色到深棕褐色,其他菌株分生孢子均为无色。3、通过设置5℃~40℃等间隔5℃的8个温度梯度,发现病菌菌丝生长温度均在5~40℃范围,最适温度为25℃。4、选用ITS、β-tubulin、EF1-α、LSU、SSU、Frpb2 6个特异引物进行PCR扩增,经序列比对,经单基因或多基因序列联合分析,结合病菌的培养学和形态学特征,将52个供试菌株鉴定为B.dothidea、B.obtusa、B.rhodina 3个种,其中48个菌株为B.dothidea,占供试菌株的92%,为山东省杨树溃疡病菌优势种,而B.rhodina和B.obtusa各2个菌株分别占4%,为山东省杨树溃疡病菌偶发种。系统发育分析显示,B.dothidea与B.obtusa和B.rhodina亲缘关系较远,而B.obtusa与B.rhodina两者亲缘关系较近,同时B.dothidea存在种内分化。5、选择病菌在培养学、形态学及分子生物学表现最为典型的代表菌株,室内采用人工刺伤接种苹果果实的方法进行不同种的病菌致病性测定,结果显示,杨树溃疡病菌3个种致病力存在差异,B.rhodina致病力最强,B.dothidea中等,B.obtusa最弱。综上,实验明确了山东省杨树溃疡病菌的种类和多样性,引起山东省杨树溃疡病的病菌仅发现3个种,上述研究结果为未来山东省杨树溃疡病的科学防控提供理论依据。