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无患子又名肥皂树，其果皮中含有丰富的无患子皂苷，主要以齐墩果酸型三萜类皂苷为主，统称为无患子总皂苷，是一种天然的非离子表面活性剂，具有杀菌、止痒、抗肿瘤、降压降脂等生物活性。本研究通过自制无患子总皂苷质控品，采用水提-米曲霉发酵法提取分离纯化天然无患子总皂苷，实验结果如下：1通过乙醇提取，石油醚除杂，正丁醇萃取，AB-8大孔树脂，MCI凝胶柱分离纯化得无患子总皂苷，泡沫实验证明其溶液能产生蜂窝状泡沫，持久15min内不消失；Libermann-Buehard反应颜色由黄-红-紫-蓝，有溶血性。 HPLC/MS分析鉴定主要为齐墩果酸型三萜皂苷，分别为Sapindoside B（882），SapindosideA（750），Mukurozi-saponin E1（924），Sapindoside L(924)，Mukurozi-saponin G(966)，Sapindoside M(966)。以齐墩果酸为标准品，通过香草醛-冰醋酸显色，皂苷元在550nm有最大吸收，进一步判定无患子总皂苷以齐墩果酸型皂苷为主，且用35%盐酸高温高压水解无患子总皂苷2h，皂苷元得率最高，通过换算可知无患子总皂苷的纯度可达95.2%以上，可作为无患子总皂苷质控品。2无患子总皂苷质控品不水解直接通过香草醛-冰醋酸显色后，在478nm处有最大吸收，以其为标准品绘制标准曲线。无患子总皂苷在100μg~1000μg的范围内，皂苷含量y（μg）与吸光度x符合以下关系：y=0.0006x+0.0838，r=0.9996，结果呈现良好的线性关系，可作为下一步工艺研究无患子总皂苷质量评价的标准曲线，此方法重现先好，精密度高，平均加标回收率为99.83%，为无患子总皂苷的质量控制提供了依据。3通过自然发酵，酵母发酵，米曲霉发酵，三者在无患子水提液灭菌与不灭菌的情况下进行对比试验，发现接种米曲霉对皂苷的纯化效果最好，且水提液灭菌与不灭菌结果相差不大，所以选择水提液不灭菌的情况下接种米曲霉进行发酵。4水提-米曲霉发酵法提取分离纯化无患子总皂苷最佳工艺条件：无患子果皮粉碎至20目，温度40℃，分三次提取，料液比和提取时间依次为1：7，5h；1：3，2h和1：2，1h，总皂苷得率33.34%，总皂苷纯度为48.71%。水提液接种米曲霉发酵，温度30℃、接种龄12h、接种量3%、摇床转速150r/min、发酵7d，皂苷得率稍有下降（33.34%→28.89%），皂苷纯度可从48.71%提高到82.47%；当发酵液pH值为7.6左右时，纯度最高，可用发酵液pH简便快速地监控发酵终点。