猪血多肽对建鲤抗氧化和免疫功能的影响

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随着集约化养殖的迅猛发展, 水产养殖病害问题日益突出。为了防治水产动物疾病,抗生素被大量应用于水产养殖。由于抗生素的大量使用所导致的药物残留等问题,抗生素在国外许多国家受到严格的限制。一些抗生素在我国也已经被禁止使用,因此寻求能有效防治水产动物疾病、替代或减少抗生素使用的药物和饲料添加剂显得非常必要和紧迫。本研究通过体外和体内实验,探讨猪血多肽(Peptides from Swine Blood, PSB)对建鲤抗氧化和免疫功能的影响,为应用猪血多肽防治水产动物疾病提供理论依据。主要研究内容和结果如下:1.体外实验:采用密度梯度离心技术,分离纯化建鲤头肾细胞、头肾巨噬细胞和外周血白细胞。将不同浓度的猪血多肽加入到鲤头肾细胞、头肾巨噬细胞和外周血白细胞的体外培养体系中作用24 h, WST-1法测定细胞增殖,NBT还原法和Griess试剂显色法测定巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和氮呼吸爆发活性。结果表明:浓度为20、40、80μg/mL的猪血多肽能显著提高外周血白细胞的增殖;浓度为40和80μg/mL的猪血多肽能显著增强头肾巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和氮呼吸爆发活性;另外80μg/mL的猪血多肽能显著提高头肾细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性。2.体内实验:将猪血多肽按不同浓度(0、0.5、1、2和5g/1kg)添加到饲料中饲喂建鲤,并在饲喂后一周、两周、四周、八周分四次采集血液和肝组织样品,制备血清和肝组织匀浆。检测血清中白蛋白(A1b)、总蛋白含量(TP)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、碱性磷酸酶(AKP)、过氧化氢酶(CAT)、白介素1p(IL-1p)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、补体3(C3)和补体4(C4)和肝组织匀浆Toll样受体4(TLR-4)。结果显示:在猪血多肽作用组中,血清中Alb和TP含量升高,AKP、SOD、CAT、GSH-Px、IL-1β、TNF-α、C3和C4含量升高;5g/kg浓度的猪血多肽可以显著增强三种抗氧化酶(SOD、CAT和GSH-Px)活性和四种免疫因子的含量(P<0.05);随着猪血多肽浓度的升高,肝组织匀浆中TLR-4含量逐渐升高。结论:猪血多肽能促进建鲤离体免疫细胞的活性,增强建鲤的抗氧化能力和免疫功能。
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