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目的： 研究针灸对TGF-β1-Smads-Snail途径介导克罗恩病(Crohns disease，CD)肠上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition，EMT)的作用机制。 方法： 将72只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、隔药灸组、针刺组、隔药灸+针刺组，每组各12只。采用2，4，6-三硝基苯磺酸(TNBS)制备大鼠CD模型，其中西药组采用美沙拉嗪溶液灌胃治疗，隔药灸组选取“天枢(双)”、“气海”穴行隔药灸治疗，针刺组选取“足三里(双)”、“上巨虚(双)”行针刺治疗，隔药灸+针刺组将上述两法结合，每次治疗1次，连续治疗14次。用肉眼、光镜对大鼠结肠大体进行损伤评分。分别采用结肠组织损伤评分、光镜、透射电镜观察各组结肠组织形态学、超微结构变化;Western blot法检测各组大鼠结肠上皮TGF-β1、TβR1、TβR2、Smad3、Snail1、E-cadherin、Fibronectin表达;RT-PCR法检测各组大鼠结肠上皮E-cadherin、Fibronectin mRNA表达;免疫荧光法检测各组大鼠结肠上皮Snail1/E-cadherin、Snail1/Fibronectin共表达情况。 结果： 1.各组大鼠结肠大体形态、结肠组织学损伤评分结果显示:与正常组相比，模型组与各干预（治疗）组均有显著性增高（P均＜0.001）。与模型组相比，各干预（治疗）组均有显著性降低（P均＜0.001）;且隔药灸+针刺组、西药组明显低于针刺组、隔药灸组(P＜0.001，P＜0.01)。 2.光镜观察结果显示:正常组黏膜上皮细胞和周围腺体排列整齐，无上皮细胞纤维化。模型组黏膜上皮为再生溃疡灶，无杯状细胞，黏膜及黏膜下层有多发纤维组织。西药组黏膜上皮细胞糜烂、坏死脱落，腺体破坏，黏膜下层有纤维组织。针刺组黏膜上皮层有大量炎细胞浸润和再生腺体，黏膜下层有大量炎细胞、纤维细胞和胶原纤维。隔药灸组黏膜上皮欠规整，有炎细胞浸润和上皮间质纤维组织增生。隔药灸+针刺组黏膜上皮细胞和周围腺体排列较整齐，无上皮细胞纤维化。 3.透射电镜观察结果显示:正常组结肠上皮细胞连接较紧密，细胞核染色质部分凝集，细胞器结构完整。模型组结肠上皮细胞连接疏松，细胞核染色质凝集，细胞器损伤明显，胞浆内有较多大小不等的空泡。西药组和针刺组结肠上皮细胞连接疏松，细胞核染色质部分凝集，细胞器部分损伤，胞浆内有空泡。隔药灸组和隔药灸+针刺组结肠上皮细胞连接较紧密，细胞核染色质部分凝集，细胞器部分损伤胞浆内可见少量空泡。 4.Western blot法检测各组大鼠结肠上皮TGF-β1-Smad3-Snail途径相关蛋白表达:(1)与正常组相比，模型组、西药组、针刺组、隔药灸组、隔药灸+针刺组TGFβ1、Tβ R2表达量均有显著性增高（P均＜0.01），与模型组相比，各干预（治疗）组TGFβ1、Tβ R2表达量均有显著性降低（P均＜0.001），其中以隔药灸+针刺组最为显著。(2)与正常组相比，模型组TβR1表达量有显著性增高(P＜0.01)，西药组、针刺组、隔药灸组、隔药灸+针刺组Tβ R1表达量则均无统计学差异（P均＞0.05）。(3)与正常组相比，模型组、西药组、针刺组、隔药灸组Smad3表达量均有显著性增高（P均＜0.001），隔药灸+针刺组Smad3表达量则无统计学差异（P＞0.05）。与模型组相比，各干预（治疗）组Smad3表达量均有显著性降低（P均＜0.001)。(4)与正常组相比，模型组、西药组、针刺组、隔药灸组Snail1表达量均有所增高（P均＜0.05），隔药灸+针刺组Snail1表达量则无统计学差异（P＞0.05）。与模型组相比，各干预（治疗）组SNAI1L表达量均有显著性降低（P均＜0.001），且以隔药灸+针刺组最为显著。(5)与正常组相比，模型组、西药组、针刺组、隔药灸组、隔药灸+针刺组E-cadherin表达量均有显著性降低（P均＜0.001）。与模型组相比，各干预（治疗）组E-cadherin表达量有显著性增高（P均＜0.01），且以隔药灸+针刺组最为显著。(6)与正常组相比，模型组、西药组、针刺组、隔药灸组、隔药灸+针刺组Fibronectin表达量均有所增高(P均＜0.05)。与模型组相比，各干预（治疗）组Fibronectin表达量则均有所降低（P均＜0.05）。 5.RT-PCR法检测各组大鼠结肠上皮Snail、E-cadherin、Fibroneetin mRNA表达结果显示:(1)与正常组相比，模型组、针刺组、隔药灸组Snail mRNA表达均有显著性增高（P均＜0.01）。与模型组相比，各干预（治疗）组Snail mRNA表达均有显著性降低（P均＜0.01），其中隔药灸+针刺组、西药组明显低于针刺组、隔药灸组（P均＜0.01）。(2)与正常组相比，模型组、隔药灸组、针刺组、西药组、隔药灸+针刺组E-cadherin mRNA表达量均有显著性降低（P均＜0.01）。与模型组相比，各干预（治疗）组E-cadherin mRNA表达量均有显著性增高(P均＜0.01)，其中隔药灸+针刺组、西药组明显高于针刺组、隔药灸组（P均＜0.01）。(3)与正常组相比，模型组、针刺组、隔药灸组Fibronectin mRNA表达均有显著性增高（P均＜0.01）。与模型组相比，各干预（治疗）组Fibronectin mRNA表达均有显著性降低（P均＜0.01），其中隔药灸+针刺组、西药组明显低于针刺组、隔药灸组（P均＜0.01）。 6.免疫荧光激光共聚焦法检测Snail1/E-cadherin、Snail1/Fibronection共表达结果显示:(1) Snail1/E-cadherin共表达:与正常组相比，除隔药灸+针刺组之外，各组Snail1表达均有显著性增高（P均＜0.001）而E-cadherin表达均有显著性降低(P均＜0.001)。隔药灸+针刺组较模型组Snail1表达则有显著性降低（P＜0.001）而E-cadherin表达有显著性增高(P＜0.001)，与正常组之间已无统计学差异（P均＞0.05）;荧光图像显示正常组有少许Snail1红色荧光与E-cadherin绿色荧光叠加的黄色荧光表达，模型组可见较多两者叠加的黄色荧光表达，各干预（治疗）组可见不同程度的两者叠加的黄色荧光表达。(2)Snail1/Fibronection共表达:与正常组相比，各组Snail1和Fibronection表达均有明显增高(P＜0.001～0.05)，而隔药灸+针刺组则仅有Fibronection表达增高（P＜0.05），且隔药灸+针刺组较模型组Snail1和Fibronection表达均有显著性降低（P均＜0.001）;荧光图像显示正常组和隔药灸+针刺组仅见微量Snail1红色荧光与Fibronection绿色荧光叠加的黄色荧光表达，模型组可见Fibronection绿色荧光以及两者叠加的黄色荧光相间表达;西药组、针刺组、隔药灸组均可见少量两者叠加的黄色荧光表达。 结论： 1、TGF-β1-Smads-Snail途径异常是导致CD肠上皮间质转化的主要环节之一。2、转录因子Snail可通过调控E-cadherin、Fibronection蛋白和mRNA表达，参与介导TGF-β1-Smads-Snail途径所致的CD肠上皮间质转化，是TGF-β1-Smads-Snail途径中的重要调控蛋白。3、针灸（隔药灸结合针刺）可能是通过调控TGF-β1-Smads-Snail途径异常，进而达到阻抑由该途径所致的CD肠上皮间质转化之效应。