【摘 要】
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本研究以贵州从江香猪为研究对象，在香猪microRNA表达谱测序的基础上，选择其中变化较大的12个microRNA研究，通过miRSystem数据库预测12个miRNA靶基因，Kobas和DAVID数据库分别对预
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本研究以贵州从江香猪为研究对象，在香猪microRNA表达谱测序的基础上，选择其中变化较大的12个microRNA研究，通过miRSystem数据库预测12个miRNA靶基因，Kobas和DAVID数据库分别对预测的靶基因进行GO分析和KEGG分析，找出繁殖相关的7个靶基因，采用RT-qPCR方法检测了12个miRNA及其靶基因在6个不同发育时期的香猪睾丸组织中的发育性变化。 本研究主要内容包括：⑴对543个小RNA的靶基因进行了预测，表达差异变化较大12个miRNA的靶基因富集于MAPK信号通路中，其中12个miRNA预测到2834个基因，经GO和KEGG分析，靶基因富集在3685个GO条目和34个信号通路中，涉及睾丸发育和精子发生等生物学过程中。⑵依据香猪的睾丸组织学变化，将6月龄的香猪睾丸样品分成幼儿期（1月）、青春期（2~3月龄）、性成熟期（4~6月龄）和老龄期（48月龄）4个发育期。⑶采用特异性茎环引物反转录，经qPCR方法检测分析，得到香猪睾丸12个microRNA的发育性表达变化规律：幼儿期起负调控作用的主要小RNA分子是：miR-222-3p、miR-16-5p、let-7f-5p、miR-181b-5p、miR-424-5p、miR-23a-3p、miR-185-5p、miR-29a-3p、miR-29c-3p、miR-1-3p；青春期起负调控作用的主要miRNA是：miR-449b-5p、let-7f-5p、miR-185-5p、miR-29a-3p、miR-29c-3p、miR-1-3p；性成熟期起负调控作用的主要miRNA是：miR-449b-5p、miR-16-5p、let-7f-5p、miR-140-3p、miR-29c-3p、miR-1-3p；老龄期起负调控作用的主要miRNA是：miR-185-5p、miR-222-3p、miR-29c-3p、miR-1-3p。⑷miR-16-5p、miR-449b-5p的表达量达到最高可以作为香猪达到性成熟的分子标记，miR-222-3p的表达水平达到最高值时提示香猪达到老龄期，可以淘汰。⑸香猪睾丸处于2月和6月龄时，MAPK1、MAP2K1基因的表达水平较高，其余月龄7个功能基因的表达水平较低。⑹miR-449b-5p可能通过MAPK途径影响从幼儿期到性成熟期睾丸的精子生成过程。
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