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目的：肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC，简称肝癌）是消化系统常见的恶性肿瘤之一，近年来肝癌的发病率及病死率逐渐升高，但其致病原因及发病机制尚未明确。随着基因检测技术及分子生物学的发展，对抑癌基因在肿瘤形成及发展过程中的作用越来越重视。本研究利用免疫组织化学技术检测肝癌及肝硬化组织中抑癌基因RASSF1A、APC、WIF-1及RNF180的表达，分析这些抑癌基因的表达与肝癌的临床分期、生存预后的相关性，探讨这些抑癌基因在肝癌的发生、发展及预后评价中的作用。方法：1研究对象及标本：河北医科大学第四医院2002年12月至2011年6月手术切除并经术后病理检查确诊的162例肝癌患者。男性135人，女性27人，年龄24岁~79岁，平均年龄57.23±7.26岁。按照2002年美国癌症联合委员会AGCC制定的TNM分期标准,进行肿瘤分期，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期分别为52、66、39和4例。共检测268例标本，其中86例肝细胞癌及对应的30例癌旁肝硬化组织标本行RASSF1A、APC、WIF-1免疫组化染色，76例肝细胞癌及其对应的76例癌旁肝硬化行RNF180免疫组化染色。随访所有患者，随访起始日期为术后第一天，随访截止日期为2013年1月1日。2免疫组化染色：所有标本石蜡包埋，采用ABC法检测RASSF1A、APC蛋白表达，采用SP法检测WIF-1、RNF180蛋白表达。具体步骤按试剂盒说明书进行，免疫组织化学结果判定采用半定量法。3统计处理：采用SPSS13.0软件统计分析。结果：1RASSF1A、APC、WIF-1及RNF180蛋白在肝细胞癌组织及癌旁组织中的表达RASSF1A免疫组化阳性着色位于细胞浆，呈黄色或棕褐色，RASSF1A在肝癌组织中阳性表达率为63.95%，在癌旁组织中的阳性表达率为83.33%，二者比较差异有统计学意义（P=0.048<0.05）。APC蛋白免疫组化染色以细胞浆棕褐色着色为阳性表达，APC在肝癌组织中的阳性表达率为67.44%，在癌旁组织中的阳性表达率为86.67%，二者比较差异有统计学意义（P=0.014<0.05）。WIF-1免疫组化以胞质内出现棕黄色为阳性，WIF-1蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为23.26%，在癌旁组织中的阳性表达率为66.67%，二者比较差异有统计学意义（P=0.019<0.05）。RNF180免疫组化特异性表达位于细胞浆，以胞浆内染色为棕褐色或棕黄色为阳性表达。RNF180在肝癌组织中的阳性率表达为39.47%，在癌旁肝硬化组化中的阳性表达率为86.84%，二者比较差异有统计学意义（P=0.006<0.05）。2RASSF1A、APC、WIF-1及RNF180蛋白在肝细胞癌组织中的表达与临床病理特征及分期的关系伴有门静脉瘤栓的肝细胞癌组织中RASSF1A、APC、WIF-1蛋白表达明显低于无门静脉瘤栓的肝癌组织中的表达（P值均＜0.05）。RASSF1A及APC表达在Ⅰ~Ⅱ分期肝癌中的表达明显高于Ⅲ~Ⅳ期肝癌组织中的表达（P值均＜0.05）。RASSF1A在有包膜的肝癌组织中的表达高于无包膜的肝癌组织中的表达（P=0.021<0.05），在HBsAg呈阴性表达的肝细胞癌组织中APC表达明显高于HBsAg呈阳性的组织(P=0.016<0.05)，在肿瘤为单发的肝癌组织中WIF-1的表达明显高于肿瘤多发的肝癌组织（P=0.027<0.05）。RASSF1A、APC、WIF-1表达与患者性别、年龄、AFP、Child-pugh分级、肿瘤大小均无关。RNF180蛋白的表达与患者的年龄、性别、Child-pugh分级、肿瘤大小、有无门静脉瘤栓、病理分化程度、肿瘤个数、临床分期、HBsAg是否呈阳性均为无关，但RNF180蛋白的阳性表达在AFP小于等于200ug/L肝细胞癌中明显高于AFP大于200ug/L肝细胞癌组织（P=0.031<0.05）。3RASSF1A、APC、WIF-1及RNF180蛋白表达与生存期的关系RASSF1A表达阴性组的平均生存期为(33.56±4.26)个月，RASSF1A表达阳性组的平均生存期为(39.21±5.13)个月。二者差异无统计学意义(P=0.687>0.05)。APC表达阴性组的平均生存期为(32.73±3.64)个月, APC表达阳性组的平均生存期为(40.69±5.36)个月。二者异无统计学意义(P=0.217>0.05)。WIF-1表达阴性组的平均生存期为(30.99±4.06)个月，WIF-1表达阳性组的平均生存期为(36.58±5.31)个月，二者差异无统计学意义(P=0.917>0.05)。RNF180表达阴性组的平均生存期为(16.42±6.39)个月，RNF180表达阳性组的平均生存期为(20.40±5.86)个月，二者差异有统计学意义(P=0.002<0.05)。多因素分析结果提示，AFP大小、有无门静脉瘤栓、临床分期、肿瘤个数和RNF180的表达为肝癌患者独立预后因素。结论：1RASSF1A、APC、WIF-1及RNF180蛋白在肝细胞癌组织中低表达，提示四个抑癌基因可能在一定程度上参与了肝细胞癌的发生。2伴有门静脉瘤栓的肝细胞癌组织中RASSF1A、APC、WIF-1蛋白表达下调，说明RASSF1A、APC、WIF-1蛋白表达促进了肝细胞癌的进展，癌组织低表达RASSF1A、APC、WIF-1蛋白者更易发生血管浸润及转移。3门静脉瘤栓的有无、癌组织RNF180蛋白表达水平是肝细胞癌患者独立的预后因子。癌组织中RASSF1A、APC及WIF-1蛋白表达水平不能作为预测肝细胞癌患者预后的独立因素。