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目的：(1)本课题拟对恶性疟原虫野外虫株进行体外培养驯化,以期为建立恶性疟原虫标准虫株提供实验材料。(2)筛选恶性疟原虫鉴定指标,初步建立恶性疟原虫生物特性评价方法。(3)为恶性疟原虫云南省地方标准株的申报做好工作累积和前期准备。研究方法：(1)本次试验主要的方法是在Trager和Jensen体外培养法的基础上发展而来。对不同冻存方法的恶性疟原虫采用体外连续培养方法,通过建立不同的体外连续培养系统,获得恶性疟原虫体外生长特性。(2)采用体外微量法对驯化培养恶性疟原虫的氯喹、双氢青蒿素、萘酚喹、哌喹敏感性进行测定,并在ICE introduction软件分析数据,计算各种抗疟药的原虫体外抑制率、ICso、IC90和IC99及其95%可信限。结果：(1)分离于中缅边境地区的F09M/01和F09M/23恶性疟原虫株,通过持续培养10个月、传代20代、冻融复苏2次,已适应体外连续培养和液氮冻存,已冻存F09M/0l恶性疟原虫实验株10ml(50%混悬液)。(2)F09M/23虫株对氯喹的IC50表达值为1.83pmol/L, IC90表达值为31.02pmol/L, IC99表达值为678.96pmol/L,95%CI为0.84～2.83pmol/L;对萘酚喹的ICso表达值为0.29pmol/L, IC90表达值为25.05pmol/L, IC99表达值为3248.82pmol/L,95%CI为0.18-0.4pmol/;对哌喹的IC50表达值为19.16pmol/L, IC90表达值为256.47pmol/L,IC99表达值为4351.76pmol/L,95%CI为14.2-24.0pmol/L,对双氢青蒿素的IC50表达值为0.78nmol/L, IC90表达值为7.58nmol/L, IC99表达值为91nmol/L,95%CI表达值为0.53-1.02nmol/L,即F09M/23虫株对氯喹、哌喹、双氢青蒿素敏感。结论：(1)采用灌注混合气体Trager改良型蜡烛缸体外培养法对F09M/01、F09M/23两株恶性疟原虫野生虫株进行体外驯化,通过持续培养10个月、传代20代、冻融复苏2次,证实两株恶性疟原虫已适应体外连续培养和液氮冻存,可作为实验虫株加以利用。F09M/01、F09M/23两株恶性疟原虫虫株在体外驯化初期密度上升较慢,持续时期为1w左右,之后原虫密度可持续增加,至12w时原虫密度上升再次出现约48h的暂缓。两株恶性疟原虫虫株的最适培养温度为37.2℃,换液频率为1次/24h,传代频率为1次/3～4d。(2)恶性疟原虫体外连续生长特性、对抗疟药物的敏感性是科学鉴定恶性疟原虫的主要指标。(3)分离于中缅边境地区、已驯化成功的F09M/23恶性疟原虫株是氯喹、哌喹、双氢青蒿素敏感性实验室虫株。