离子交换层析用于重组人血清白蛋白分离和纯化研究

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通过层析实验,比较了几种阴离子交换剂(Q Sepharose FF、DEAE Sepharose FF和QAE Sephadex)在不同温度、起始缓冲液pH值和离子强度、进样流速、进样浓度、洗脱液pH和离子强度等条件下人血清白蛋白的吸附与脱附性能,研究了它们对人血清白蛋白和卵清蛋白值的分离能力,并考察了在不同操作条件下柱层析过程中吸附载体对重组人血清白蛋白和杂蛋白的分离选择性;根据产品纯度和回收率,确定出适合的阴离子交换剂和操作工艺参数.实验表明:DEAE Sepharose FF载体不仅对重组人血清白蛋白具有良好的分离度,而且有较高的回收率.根据实验结果,确定出适宜的阴离子交换层析操作条件,其中吸附条件:起始缓冲溶液为pH=6.0,浓度为0.005mol/L的磷酸氢钠溶液,吸附流速为3.49ml/min;脱附条件:二阶段梯度洗脱--NaCl溶液浓度分别为0.1mol/L和0.2mol/L,NaCl溶液用pH=8.0,浓度为0.005mol/L的磷酸氢钠溶液配制而成,脱附流速为3.49ml/min.运用传质速率机理模型,研究人血清白蛋白在穿透曲线与洗脱曲线,发现模拟计算值与实验值吻合的较好,说明该模型能够正确反映实际的吸附过程.
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