海洋溶藻细菌的分离鉴定与作用机理研究

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溶藻细菌作为水生生态系统生物种群结构和功能的重要组成部分之一,是一类以直接或间接的方式抑制藻类生长、杀死藻类或者溶解藻类细胞的细菌的统称,其对维持藻类生物量平衡具有重要的作用。本文以“菌治藻”为思路,以赤潮藻类米氏凯伦藻为研究对象,从赤潮海域底泥中筛选高效海洋溶藻细菌,并鉴定到属,同时探讨了该溶藻细菌的的溶藻机理,旨在为赤潮藻类的生物防治提供一定的理论依据及实践基础,主要结论如下:  1.从发生过赤潮的海区底泥中分离出8株细菌,分别与处于指数生长期的米氏凯伦藻共培养,从中筛选出具有显著溶藻效果的细菌N3。革兰氏染色显示N3为革兰氏阴性,在扫描电镜下观察,N3为杆状,大小为0.7-0.9μm×1.5-2.2μm,无芽孢,无鞭毛。结合16S rDNA同源序列分析,确定该溶藻细菌N3为拟杆菌属Bacteroides。  2.连续实验8d,盐度对溶藻效应影响的顺序为:30‰>25‰>35‰>20‰>15‰;温度对溶藻效应影响的顺序为:35℃>30℃>25℃>20℃;全黑暗条件下的溶藻效应强于全光照和光循环;溶藻细菌N3对米氏凯伦藻的作用表现出“低浓度促进,高浓度抑制”的效应。  3.菌液、滤液(不处理)、滤液(高温处理)和菌体分别与米氏凯伦藻共培养,发现菌体组藻体生长未受影响,其它三组影响显著,表明溶藻细菌N3分泌的溶藻活性物质具有很高的热稳定性。  4.光学显微镜下观察,溶藻作用初期,藻细胞的游动性减慢甚至停止,随后大部分藻细胞结构发生变化,形成暂时性孢囊抵抗逆境,最终藻细胞结构破坏,藻细胞裂解死亡。  5.实验发现,为了抵抗溶藻细菌对藻体的危害,藻细胞内产生了一系列抗氧化酶,通过提高抗氧化酶活性清除过多的氧自由基,保护藻细胞。但当藻细胞进一步受到氧化损伤,抗氧化酶活性受到抑制。在溶藻过程中,藻细胞内的丙二醛含量增高,说明其细胞膜脂过氧化损伤严重,自身系统不能修复,最终导致藻细胞死亡。
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