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中枢神经系统(central nervers system，CNS)脱髓鞘疾病如多发性硬化(multiple sclerosis，MS)是神经系统常见病，好发于青壮年，发病率高，致残率高，多表现为阶梯式进展性病程，其确切发病机理尚不完全清楚。目前认为它是一种多病因的疾病，病毒感染在发病过程中可能起一定作用，在环境和遗传的影响下，通过变态反应的免疫障碍而发病。其发病机理与其它自身免疫性疾病相似，是自身抗原、非特异性T细胞活化和T细胞尤其是CD4~+T辅助细胞1(Thelper cell，Th)介导的炎症反应共同参与了脱髓鞘疾病的发病过程。髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein，MBP)既是神经髓鞘的重要成分，又是CNS脱髓鞘疾病的重要抗原。用MBP免疫动物诱发的实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis，EAE)在临床表现、免疫病理和免疫化学方面与人类CNS脱髓鞘疾病有很多相似之处，是研究CNS脱髓鞘疾病的经典动物模型。树突状细胞(dendritic cell，DC) 作为体内最强的抗原呈递细胞(antigen presenting cell，APC)在CNS脱髓鞘疾病中发挥着重要的作用。相关研究表明DC对EAE原发免疫反应的诱导、免疫耐受的诱导及T细胞分化成Th1或Th2细胞反应中发挥重要作用。DC的功能具有可塑性，通过体外培养环境的调控可以改变DC的功能或使其定向分化，进而改变已存在或正在发生的初始型T辅助细胞(Th0)向Th1、Th2细胞的分化。因此，对EAE的起病及病情进展中DC的变化以及DC的作用研究已逐渐成为人们研究的热点。国外一些学者已经注意到了DC在CNS脱髓鞘疾病中的作用，而国内尚未见中文摘要报道。 本实验采用体外细胞培养的方法，分离EAE易感性BALB/c小鼠脾脏的DC，在体外分别与MBP及重组小鼠工L一4、工L一3共培养，然后分别取上述不同条件下培养的DC与去除DC的单个核细胞共培养，检测培养液上清液中工L一4、IFN一Y的含量，以明确不同亚群的DC对T辅助细胞分化为Thl、ThZ细胞的影响。为通过调节DCI/DCZ来调控Thl/ThZ的应答平衡，从而调控Thl、ThZ细胞的优势应答类型，阻止Thl细胞介导的细胞免疫反应，促进CNS脱髓鞘疾病的恢复、减少复发提供实验依据。 本实验的结果如下: 1、MBP刺激下，重组小鼠IL一3、GM一CSF与EAE易感BALB/C小鼠DC前体细胞共培养，DC前体细胞向DCZ分化增加(另文发表);取上述条件下培养的DC与去除DC的单个核细胞共培养，其上清液中IL一4水平较对照组明显升高，工FN一Y含量与对照组无显著性差异。实验组工L一4平均含量10.9457士2.9180，对照组平均含量9.2057士1.3187二者比较有显著性差异(t=2.10，P<0.05)。实验组工FN一Y平均含量27.8422士3.5225，对照组平均含量28.6565士4.4724，两组比较无显著性差异(t=2.10，P>0.5)。 2、MBP刺激下，重组小鼠工L一4、GM一CSF与EAE易感BALB/c小鼠DC前体细胞共培养，DC前体细胞向DCI分化增加(另文发表);取上述条件下培养的DC与去除DC的单个核细胞共培养，其上清液中IFN一Y水平明显升高，IL一4含量与对照组无显著性差异。实验组工FN一Y平均含量23.8561士1.5361，对照组平均含量21.2755士3.2149，两组比较有显著性差异(t=2.1，P<0.05)，实验组工L一4平均含量9.1826士1.5361，对照组平均含量9.9609士1.2728，两组比较无显著性差异(t=1.51，P>0.1)。 本实验提示: l、通过改变DC生长的细胞因子微环境，可以改变DC的 分化方向。 2、不同亚群的DC对促进ThO细胞分化的影响不同，DCI 2 上调Tho 细胞向Thl 细胞分化，DCZ 上调Tho细胞向 ThZ细胞分化。 3、可通过调控DCI／DCZ而调控Thl／ThZ细胞的平衡。