目的体外培养获得细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞），研究其表型与生物学活性，并探讨分析自体CIK细胞联合化疗治疗恶性黑色素瘤术后患者的临床意义。方法利用Ficoll分离液从外周血中分离单个核淋巴细胞，通过INF-γ、rhIL-2、rhIL-1α、anti-CD3McAb诱导培养，获得大量CIK细胞。流式细胞分析法对CIK细胞进行动态表型分析；MTT法检测不同阶段CIK细胞的杀伤活性。对37例恶性黑色素瘤术后行六周期化疗的患者进行回顾性分析研究，其中12例患者化疗结束后接受CIK细胞回输治疗，25例单纯化疗，化疗均采用CVD方案：顺铂20mg/m~2D1-5，长春碱1.6mg/m~2D1-5，氮烯咪胺800mg/m~2D1。对自体CIK细胞治疗前后患者外周血T细胞亚群检测结果进行随访观察，并应用log-rank检验对两组中位生存期及中位无进展生存期进行比较。结果①CIK细胞体外显著扩增，培养第14天至21天期间形成高峰平台，CIK细胞对K562及Raji细胞的细胞毒活性在14天时达峰值，分别为（76.65±16.78）%与（75.32±15.61）%。②CIK联合化疗组患者外周血NK、CIK（CD3~+CD56~+）、CD3~+与CD4~+细胞百分比以及CD4~+/CD8~+比值明显升高，CD8~+细胞比例下降；而单纯化疗组上述指标没有显著变化。③CIK联合化疗组与单纯化疗组患者的中位总生存期分别为66个月（95%CI：47.04~85.09月）与45个月（95%CI：）a，差异无统计学意义(χ~2=1.710，P=0.191)；两组中位无进展生存期分别为33个月（95%CI：18.830~48.570月）与17个月（95%CI：8.441~26.22月），差异有统计学意义(χ~2=6.768，P=0.009)。结论培养至第14天CIK细胞增殖与杀伤活性均达到峰值，适合应用于治疗。采用自体CIK细胞治疗恶性黑色素瘤术后患者可以促进化疗后免疫功能的恢复，延长无进展生存期。