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怀地黄[Rehmannia glutinosa f.hueichingensis(Chan et Sehih)Hsiao]为玄参科地黄属多年生草本植物,其根可入药,具滋阴健肾、消热解毒等功效。由于长期采用营养繁殖,病毒感染严重,导致其产量下降、品质变劣、品种退化。为了解决这一问题,近年来我们建立了怀地黄脱毒快繁及产业化技术体系,在此基础上,进一步对脱毒苗进行离体保存并从形态、生理、产量和品质等方面对其大田表现进行了深入的研究,结果如下:
1.对怀地黄脱毒试管苗进行了缓慢生长保存
常温下,保存脱毒苗的最佳基本培养基和封口材料为MS+封口膜+牛皮纸;有利于脱毒苗在MS+NAA0.0.mg·L-1+6-BA0.2 mg·I-1培养基上保存的几种添加物质及其浓度分别是PP3331mg·L-1、ABA0.5 mg·L-1、蔗糖45~60 g·L-1、甘露醇20 g·L-1、冷凝脂7g·L-1,其中以PP3331mg·L-1的保存效果最好,在此浓度下保存180 d时,存活率为68%。低温下,保存脱毒苗的最佳PP333浓度为2 mg·L-1,最佳甘露醇浓度为30 g·L-1,在此浓度下保存240 d时,存活率分别为67%和64%。
2.对脱毒苗大田生物学性状进行了研究
(1)形态:脱毒苗(脱毒试管苗和脱毒种栽苗,下同)在冠幅、株高、功能叶片长和宽等方面均比非脱毒苗(非脱毒试管苗和对照,下同)有较大优势,表明脱毒苗生长势强。
(2)生理:脱毒苗的叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总含量均高于非脱毒苗,这有利于其维持较强的光合强度,同化更多的光能,积累更多的有机物,为其产量的提高提供一定的物质基础和生理基础;脱毒苗叶片中POD、SOD活力均低于非脱毒苗;脱毒苗叶片中前期可溶性总糖含量高于非脱毒苗,后期低于非脱毒苗,表明脱毒苗生长前期光合能力强,后期具有很强的营养物质及时外运能力;脱毒苗叶片中可溶性蛋白含量在各个时期均较非脱毒苗高,表明脱毒后可以合成更多有机化合物,有利于怀地黄的生长发育;脱毒苗与非脱毒苗净光合速率、蒸腾速率、气孔导度的日变化规律一致,但前者各项指标的值均明显高于后者。
3.对脱毒苗的产量和品质进行了评价
脱毒苗的产量显著高于非脱毒苗,增产最高可达92.51%。脱毒苗块茎中梓醇、可溶性总糖和可溶性蛋白含量均得到不同程度的提高。
由此可见,怀地黄脱除病毒后,在田间表现出了良好的生物学性状,产量大幅度提高,品质得以改善,应在生产中迅速推广应用。