尽管认知障碍是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)等tau蛋白病的主要临床表现,但是运动功能受损、植物神经功能紊乱很常见。各种神经变性病的临床症状和生物标志物之间有很多重叠。生物标志物在中枢神经系统不同区域的表达对疾病的诊断和临床症状评估具有重要意义。近年来研究发现轴浆运输障碍是神经变性病的重要病变机制,而过磷酸化tau蛋白、泛素、淀粉样蛋白前体(amyloid precursor protein,APP)更是轴浆运输的主要负荷(cargo)之一,近年研究提出了TDP-43在ALS脊髓、FTLD-U等泛素阳性包涵体的主要蛋白成分,并提出了TDP-43病的新概念。上述研究更凸显AD脊髓病理研究的重要性。　　 取病理证实的3例AD患者脊髓,5例非痴呆性疾病其它神经系统疾病、2例老龄和1例中年无神经系统重大疾病患者脊髓为对照,T2、T8、T10、L4和S2平面取材。常规脱水、石蜡包埋。连续切片,厚度7um,行HE及Gallyas-Braak染色,行过磷酸化tau蛋白(AT81)、α-synuclein、Aβ、APP、ubiquitin及TDP-43免疫组织化学染色(S/P法),光镜观察在生物标志物在在AD脊髓的病理改变特点。　　 研究发现:1)3例AD中2例在脊髓前角运动神经元出现NETs,3例出现AT8阳性轴索或轴索样结构,3例胶质细胞均AT8表达,AT8阳性程度与脑内神经元缠结(NFTs)程度正相关。2)3例AD中1例证实ADIB,其胸髓侧角内出现Lewy小体样结构,骶髓灰质腹侧出现散在Lewy轴索样结构。3)尽管本组AD脑组织均出现大量老年斑,但脊髓未出现淀粉样蛋白沉积或APP的表达；4)AD脊髓神经毡和白质轴索均有较多点状Ubiquitin表达,但与老龄和中青年对照组无明显差别；5)本组AD脊髓未见TDP-43表达。　　 综合以上结果并结合文献分析,AD脊髓出现过磷酸化tau蛋白和α-Synuclein免疫活性结构,可能与AD晚期出现运动障碍和自主神经功能障碍有关。与其它神经变性病相比,过磷酸化tau蛋白在AD轴索病变机制中发挥可能更为重要的作用。　　 目的:分析人类家族性朊蛋白病差异蛋白质组,以探寻其生物标志物。　　 方法:取我国3例家族性朊蛋白病患者脑组织额中回皮质,以3例心脏猝死且无神经系统病变病例脑组织为对照,并进行荧光双向差异凝胶电泳,将获得的2副三通道荧光图输入配套的图像分析软件Image Master2D Platinum、ImageQuant、DeCyder(Version6.5)进行分析,分析得到的差异蛋白点进行质谱鉴定,明确差异蛋白点性质。　　 结果:在本次实验中共发现12个差异蛋白点,鉴定了得到6个蛋白质,分别是泛素、肌动蛋白结合蛋白2、半乳素-1、Rab-相互作用溶酶体蛋白、斯里兰卡肉桂咸受体2和血色素β亚单位。其中4种蛋白质与错误折叠蛋白质水解、清除有关,其中2种蛋白质还与轴浆变性有关,1种蛋白质与钙离子通道病变有关。　　 结论:泛素、肌动蛋白结合蛋白2、半乳素-1、Rab-相互作用溶酶体蛋白、斯里兰卡肉桂咸受体2在朊蛋白病发病机制中可能发挥作用。　　 第三部分 PRNP基因7组八肽重复插入突变的家族性克雅氏病临床及分子生物学特征　　 目的:评估1例PRNP基因7组八肽重复区插入突变、129位密码子为甲硫氨酸纯合子的家族性克雅氏病的临床特点、神经病理和异常朊蛋白分子生物学特征。方法与结果:1例47岁性患者临床症状、家族史、脑组织神经病理、及脑组织可检测到PrPSc,确诊为克雅氏病病例。提取病人脑组织DNA进行PRNP基因扩增,在约750 bp处可见明显扩增条带,与预期的PRNP基因大小相符；此外在900 bp处还可见另一清晰的扩增条带,分别回收纯化两条PCR产物进行DNA测序,发现较短的PCR扩增产物其序列与人野生型PRNP基因序列完全一致,另一条较大分子量PCR产物总长度为927 bp,含有168 bp的插入片段,为7个八肽重复序列的插入突变。患者129位为甲硫氨酸纯合子。　　 结论:与文献已报道的来自4个家族的携带7个八肽重复序列插入突变序列相比较,发现本病例插入的7个八肽重复序列和基因排列与已报道的病例存在显著差异。本患者临床特点与文献报道的其它7组八肽重复区插入突变病例不一致,临床表现更接近散发性CJD。