【摘 要】
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随机扩增多态性DNA(RAPD)是近年来发展起来的一种分子标记技术,该研究利用这种技术对Thatcher及已知的21个以Thatcher为遗传背景的小麦抗叶锈病近等基因系(NIL)及7个不同的小
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随机扩增多态性DNA(RAPD)是近年来发展起来的一种分子标记技术,该研究利用这种技术对Thatcher及已知的21个以Thatcher为遗传背景的小麦抗叶锈病近等基因系(NIL)及7个不同的小麦品种进行了分析,结果如下:1、建立了适合本实验室应用的小麦RAPD分析的优化反应体系及反应程序.研究以29份小麦基因组DNA为模板,对RAPD反应应程序中的一些重要参数进行摸索和优化试验,通过与以前的研究结果进行比较,提出小麦RAPD分析最佳反应体系的建立应根据实际情况,对影响扩增的各种因素进行调整,建立一套适合该实验室使用的应用体系及反应程序.2、筛选出一个与Lr38抗病基因连锁的RAPD标记S33-800.该研究脂用160个随机引物对小麦抗叶锈近等基因系进行了分析,其中绝大多数引诉增能扩增出1~9条明显可辨的条带.3、回收了一条800bp的特异性片段.采用热溶化-苯酚-氯仿抽提法对引物S33在Sr38/6<*>Thatcher中扩增出的800bp的特异性片佰进行回收,回收片段经相应引物进行扩增后,用琼脂糖电泳检测,结果显示,条带清楚,行异性好,反应物中的引物和非特异性产物已去除干净.
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