天麻对大鼠脾脏放射损伤的保护作用及机制探讨

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目的探讨天麻对大鼠脾脏放射损伤是否具有保护作用及其作用机制。方法将健康雄性SD大鼠54只,随机分为3组,对照组、照射组、实验组,每组18只。对照组:不照射,实验前2天至实验后7天按体重连续予以生理盐水2ml/10g灌胃,1次/天;照射组:用60Coγ射线行全身照射,总剂量为6Gy,照射前2天至照射后7天按体重连续予以生理盐水2ml/10g灌胃,1次/天;实验组:用60Coγ射线行全身照射,总剂量6Gy,照射前2天至照射后7天按体重连续予以天麻注射液2ml/10g灌胃,1次/天。分别于照射后1、3、7天每组取6只大鼠颈椎脱臼处死取脾脏,用比色法进行脾脏MDA含量、SOD活力测定以了解组织氧化损伤的情况,用TUNEL检测细胞凋亡率、Western blot法检测Bcl-2、Survivin蛋白表达以及用比色法测定Caspase-3活性以了解天麻对细胞的凋亡的影响,并取标本在光镜下观察脾脏组织病理学改变。结果1.各组MDA含量及SOD活性变化显示:照射组、实验组MDA含量均高于对照组,SOD活性均低于对照组,P<0.05,照射组MDA含量高于实验组,SOD活性低于实验组,P<0.05;间接反映出细胞损伤程度实验组较照射组轻。各时间段间,对照组1d、3d、7d MDA含量与SOD活性无显著性差异,P>0.05,照射组与实验组MDA含量3d>7d>1d,SOD活性3d <7d <1d, P<0.05。2.各组大鼠脾脏组织细胞凋亡变化情况:照射组、实验组的细胞凋亡率、Caspase-3酶活力均高于对照组P<0.05,照射组的细胞凋亡率、Caspase-3酶活力高于实验组,Bcl-2及Survivin蛋白表达低于实验组,P<0.05,提示实验组的凋亡较低;各时间段间,对照组1d、3d、7d各指标均无显著性差异,P>0.05。照射组与实验组细胞凋亡率、Caspase-3酶活力1d>3d>7d,Bcl-2及Survivin蛋白表达1d <3d <7d,P<0.05。3.各组大鼠脾脏病理切片可见:对照组可见包膜完整,红白髓界限清楚,血管分明,生发中心明显,细胞排列紧密,边缘区内可见个别散在凋亡细胞。与对照组相比,照射组、实验组脾脏包膜完整,细胞排列稀疏,白髓及边缘区内可见大量凋亡细胞,各期凋亡细胞形态均可见到,红细胞渗出。与照射组相比,实验组各时间段的细胞排列较紧密,凋亡细胞相对较小,红细胞渗出较少。天麻在一定程度上减轻了组织放射损伤情况;组间,对照组1d、3d、7d病理无明显差异性改变,照射组1d较3d凋亡细胞相对较少,红细胞渗出相对较轻,7d较3d稍有恢复,实验组1d较3d凋亡细胞有所恢复,红细胞渗出相对较轻,7d较3d稍有恢复。结论天麻能使SD大鼠脾脏放射损伤后的MDA含量减少、SOD活性提高、Survivin、Bcl-2抗凋亡蛋白表达增加、Caspase-3活性下降、细胞凋亡率下降,对脾脏的放射性损伤具有保护作用。
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