氧合血灌注对离断肢体保护作用的实验研究

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目的:通过动物实验观察采用氧合血间断灌注法对离断肢体的保存效果,对离断肢体保存方法的有效性进行探索评价,为临床上离断肢体的有效保存和延长离断肢体的再植时限提供思路。方法:选择健康新西兰大白兔32只,雌雄不限,体重2~2.5kg,随机分为对照组、肝素水组、氧合血组和单纯低温组四组,每组8只。建立动物肢体完全离断实验模型,取断肢32只,肢体离断即刻记为0h。对照组(C组):不做灌注处理同时也不做低温处理进行保存;肝素水组(H组):肢体离断4h后采用肝素生理盐水每小时一次,连续四次,输注速度为50ml/h,灌注量为20ml间断灌注进行保存;氧合血组(O组):肢体离断4h后采用氧合血同样间断灌注方法进行保存;单纯低温组(HT组):肢体离断后即刻起采用单纯低温方法保存8小时进行保存。各组于肢体离断后的第0h、4h、8h、12h、24h取其胫前肌,制作病理切片,且在光镜下观察其骨骼肌细胞以及微血管的病理学变化;一并做出生化检测,测定其肌肉组织中MDA、SOD、ALT、ALP、MPO和GLU的含量,最后采用SPSS19.0统计软件进行数据分析。结果:随着时间的延长,各组离断肢体的病理变化均呈逐渐加重的趋势:肌纤维间隙变宽,细胞水肿加重,横纹肌排列紊乱,可见到肌细胞内横纹发生溶解,肌间隙中有红细胞渗出,炎性细胞浸润现象。肝素水组在第8h、12h和24h各时点的病理变化相较对照组细胞水肿更为明显;单纯低温组在第4h、8h、12h和24h各时点的病理变化较对照组损伤程度轻,肌间隙变宽程度小,红细胞渗出少;氧合血组在第8h、12h和24h各时点的病理变化较对照组以及肝素水组肌肉组织损伤减轻,肌间隙变宽不明显,血管内红细胞增多,与单纯低温组相比在第12h和24h肌间隙变宽程度小,组织水肿现象不明显。随着时间的延长,各组肌肉组织中MDA、ALT、ALP和MPO含量呈现增高趋势,SOD和GLU含量呈现下降趋势,各指标中第4h与第0h相比均没有统计学差异,对照组与肝素水组第8h、12h和24h与第0h相比有统计学差异(P<0.05),单纯低温组第12h和24h与第0h相比有统计学差异(P<0.05),氧合血组第24h与第0h相比有统计学差异(P<0.05)。肝素水组与对照组相比在第8h、12h和24h各时点各检测指标均无统计学差异;单纯低温组与对照组相比在第8h、12h和24h各时点MDA、ALT、ALP和MPO的含量低,SOD、GLU含量高,有统计学差异(P<0.05);氧合血组与对照组相比在第8h、12h和24h各时点MDA、ALT、ALP和MPO的含量低,SOD、GLU含量高,有统计学差异(P<0.05),氧合血组与肝素水组相比在第8h、12h和24h各时点MDA、ALT、ALP和MPO的含量低,GLU含量高,有统计学差异(P<0.05),且ALT和GLU含量也低于单纯低温组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肢体在离断后4小时开始进行氧合血液间断灌注在一段时间内可通过减轻自由基对组织的损伤以及有氧代谢提供能量等途径有效的保护离断肢体,降低肢体缺血再灌注损伤,延长离断肢体的保存时限,并且与单纯低温保护方法相比有一定的优势。
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