赛伐珠单抗偶联奥沙利铂脂质体制备及对HCC细胞株体外靶向性的研究

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目的:本研究旨在制备抗VEGF单克隆抗体赛伐珠单抗(Sev)修饰奥沙利铂(OXA)脂质体,以提高奥沙利铂(OXA)对肝细胞癌(HCC)细胞的靶向性,达到高效、低毒的抗肿瘤作用,并通过体外细胞MTT和荧光标记脂质体培养细胞实验评价该免疫脂质体对HCC细胞株的细胞增殖抑制作用和靶向性。方法:采用薄膜分散法、逆向蒸发法和逆向蒸发结合冻融法制备免疫脂质体,根据脂质体包封率高低,最终选择逆向蒸发结合冻融法制备免疫脂质体,并考察该方法制备出的免疫脂质体的形态、粒径、包封率、抗体偶联率、抗体活性、体外释药率等性质。以人HCC细胞株Bel7402和HepG2为实验对象,采用MTT实验及细胞摄取荧光标记脂质体实验观察OXA免疫脂质体对细胞的毒性及靶向能力。结果:成功制备OXA免疫脂质体,包封率平均为15.91%,其平均粒径为182.9nm,平均电位为-29.2mV。电镜下观察该免疫脂质体的形态为类圆球形,抗体偶联率为43.76%,活性保持为84.38%,96h后累计释药率为82.34%。MTT细胞毒性实验结果表明该脂质体材料对Bel7402和HepG2细胞没有明显的毒性,OXA免疫脂质体对HCC细胞Bel7402和HepG2的细胞毒性强于普通OXA脂质体及游离OXA。激光共聚焦显微镜观察到HCC细胞Bel7402和HepG2对OXA免疫脂质体的摄取高于普通OXA脂质体。初步判断该OXA免疫脂质体体外对HCC细胞具有一定的靶向性。结论:本研究成功制备出OXA免疫脂质体,该免疫脂质体粒径分布均匀,且抗体活性保持在高水平。该OXA免疫脂质体具有体外主动靶向HCC细胞株Bel7402和HepG2的能力,且能抑制HCC细胞生长,值得进一步深入研究。
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