黄瓜嫁接砧木根系中硅转运蛋白基因的克隆与表达分析

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhanggang406
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黄瓜(Cucumis sativus L.)是设施栽培的主要蔬菜之一,果面蜡粉是其重要的商品性状。自根黄瓜以及采用不同砧木嫁接的黄瓜果面蜡粉发生情况不同,与根系对硅的吸收分配特性密切相关。为探讨黄瓜吸收转运硅的机制以及与果面蜡粉形成的关系,本论文从去蜡粉能力明显不同的黄瓜嫁接砧木品种‘云南黑籽南瓜’和‘黄诚根2号’根系中克隆到硅转运蛋白基因CmLsi1、CmLsi2和CmLsi3,并在此基础上分析了CmLsi1、CmLsi2以及CmLsi3的表达特性。主要结果如下:(1)从去蜡粉能力较弱的砧木‘云南黑籽南瓜’和去蜡粉能力较强的砧木‘黄诚根2号’根系中克隆的CmLsi1和CmLsi2基因核苷酸序列与NCBI上提交的序列完全一致;克隆到的CmLsi3基因,在GenBank的注册号分别为KM203110和KM359142。(2)砧木‘云南黑籽南瓜’和‘黄诚根2号’CmLsi3基因的cDNA全长均为1206bp,开放阅读框795bp,编码264个氨基酸,与黄瓜、玉米、大麦等植物硅转运蛋白氨基酸序列同源性均在50%以上,且两者有4个位点氨基酸序列不一致;CmLsi3蛋白含有2个NPA模体、6个跨膜结构域和一个由Gly(G)、Ser(S)、Gly(G)和Arg(R)组成的ar/R选择性过滤器,属于水通道蛋白NIPⅢ亚家族。(3)CmLsi3基因在砧木的根、茎、叶均有表达,但以叶中的表达量最高,茎中其次,根中的表达量最低。‘云南黑籽南瓜’各器官中CmLsi3基因的表达水平均高于‘黄诚根2号’。(4)1.7mM硅处理能够显著下调‘云南黑籽南瓜’自根苗及其嫁接黄瓜苗根系中硅转运蛋白基因CmLsi1(B+)、CmLsi2-1、CmLsi2-2和CmLsi3的表达,而‘黄诚根2号’自根苗及其嫁接黄瓜苗根系中硅转运蛋白基因CmLsi1(B-)、CmLsi2-1、CmLsi2-2和CmLsi3的表达不受硅供给的影响。
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