乐复能对实验性结肠炎小鼠TNF-α和IL-13表达的影响及意义

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目的:观察乐复能(Novaferon)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的实验性结肠炎小鼠模型结肠粘膜中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-13(IL-13)表达的影响,了解乐复能对UC的作用及可能的机制。为生物制剂治疗UC提供实验依据,寻找临床治疗溃疡性结肠炎有效方法。方法:70只Balb/C雌性小鼠,8周龄左右,体重18-22g/只,清洁级。随机分为七组:分别为正常组、模型组、美沙拉嗪治疗对照组、泼尼松治疗对照组以及乐复能低、中、高剂量组,每组10只。采用4%葡聚糖硫酸钠(DSS)水溶液自由饮用的造模方法制作急性溃疡性结肠炎小鼠模型后给药7天。造模开始第二天,各组同时分别给予无菌生理盐水、无菌生理盐水、美沙拉嗪40mg/ml、泼尼松5mg/kg灌胃,0.2ml/次,1次/日,乐复能0.1ug/ml、0.2ug/ml、0.3ug/ml腹腔注射,0.2ml/次,1次/日。实验期间观察并记录小鼠的一般情况、体重、粪便性状及隐血或便血情况,实验第八天处死小鼠,游离并取出全段结肠,测量回盲部至肛门的长度。然后用预冷生理盐水洗净结肠,取部分结肠组织4%的甲醛固定,常规石蜡包埋、HE染色。观察指标包括:疾病活动指数(DAI)、结肠长度、组织学损伤评分;免疫组织化学法检测结肠组织中TNF-α和IL-13的表达。结果:1.使用DSS的各干预组小鼠均不同程度的出现腹泻、粘液便、大便隐血阳性或血便等症状,随天数增加小鼠DAI积分逐渐增高。乐复能可以改善小鼠的一般状况,降低小鼠的DAI积分,减轻结肠长度缩短情况,降低组织学损伤评分。2.与模型组相比,乐复能高剂量组和美沙拉嗪处理组UC小鼠结肠粘膜中TNF-α的表达下降(P<0.05)。IL-13方面,与模型组相比,乐复能高剂量组,美沙拉嗪组和泼尼松处理组UC小鼠结肠粘膜中IL-13的表达下降(P<0.05)。其中乐复能高剂量组较低剂量组更显著降低IL-13的表达值,比较差别有统计学意义(P<0.05)。结论:DSS诱导的小鼠急性结肠炎模型能模拟临床UC的疾病特点。乐复能可下调实验性结肠炎小鼠模型中的细胞因子TNF-α和IL-13的表达,疗效与剂量有一定的相关性。
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