长链非编码RNA NONHSAT176189.1在喉癌中的表达研究

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喉癌(laryngeal carcinoma,LC)是临床上常见的头颈部恶性肿瘤,中医也称喉瘤、喉疳等,可发生于喉内任何部位,以声门区癌最为常见,其次为声门上区癌,声门下区癌少见。流行病学研究表明,男性是喉癌发病和死亡的危险人群[1]。人们对喉癌等肿瘤的研究从未停止脚步,但目前喉癌发病病因仍不十分明了,公认的有吸烟、饮酒、病毒感染、环境污染以及放射线长期接触史等。治疗则主要以手术切除为主,也包括放化疗、中药治疗等综合治疗。然喉癌的五年生存率尤其中晚期并不理想,而且喉癌患者在病程中饱受发音、饮食、呼吸困难所造成的身心双重压力。因此以积极探索喉癌发病机制,寻求新的诊断提示信号等科学手段为研究方向,有助于疾病早期诊断,有利于依据根源发现新的诊治方式,是具有潜在研究价值的。长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)是目前各种研究尤其是与包括肿瘤在内的多种人类疾病相关方向的一大热点。近年来,lncRNA在基因组印记、修饰染色质、激活或干扰转录和翻译及其他重要生物学过程等方面的研究如火如荼,大量文献报道lncRNA与包括喉癌在内的多种肿瘤的发生发展密切相关。目的:本实验是依据高通量测序已筛选出的在喉癌组织中具有差异表达特性的lncRNA结果,进一步验证长链非编码RNA NONHSAT176189.1在喉癌的发生发展中的作用,为喉癌发病机制的新探索以及发现新的分子标记物提供依据。方法:(1)选取2018年09月-2019年12月就诊于吉林大学第二医院耳鼻咽喉头颈外科的30例患者,经术前、术后病理检查明确诊断为喉鳞状细胞癌,经患者知情同意,于喉部分切除术中留取喉癌组织及对应癌旁组织。(2)利用生物公司试剂盒对30对标本进行Trizol法总RNA提取——DNA酶处理去除基因组DNA——逆转录成c DNA——普通PCR(聚合酶链式反应)——琼脂糖凝胶电泳检测——q PCR(实时荧光定量聚合酶链式反应)。(3)数据分析:利用2^-△△Ct法计算比较癌与癌旁组织中目的基因的相对表达量的统计学关系,随后按性别、是否有淋巴结转移、TNM分期(T1-T2/T3-T4),分为3个组别进行数据统计和统计学分析。结果:琼脂糖凝胶电泳图片的条带明暗不同初步显示NONHSAT176189.1在喉癌组织与对应的癌旁组织中存在差异性表达。经统计学分析q PCR结果示NONHSAT176189.1在癌组织与对应的癌旁组织中的差异性表达具有统计学意义(P<0.05),与性别、淋巴结是否转移以及TNM分期的相关性无统计学意义。结论:lncRNA NONHSAT176189.1在喉癌组织与对应的癌旁组织中存在差异性表达,且在喉癌组织中目的基因表达下调,提示lncRNA NONHSAT176189.1对于喉癌来说可能是抑癌基因的存在。为后续喉癌发病机制的新探索提供前提,也提示lncRNA NONHSAT176189.1有可能成为喉癌的新型分子标志物,为早期诊断、判断预后等提供依据。
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