通过向恶性肿瘤患者体内注入某种特异性亲肿瘤的放射性标记药物，以实现对恶性肿瘤的定位和有效治疗，一直是放射性药物和核医学领域研究的热点。单克隆抗体作为特异性载体，已经在放射免疫显像和放射免疫治疗中得到广泛的应用，并且在预定位显像及治疗中取得令人鼓舞的成果。近年来，随着基因研究的发展、反义技术的出现，用放射性标记反义寡核苷酸探针，经体内核酸杂交而进行的反义显像和反义治疗更得到极大的关注，成为继放射免疫显像和治疗之后又一个研究重点。 目前已经有多种寡核苷酸被应用于反义研究中，包括DNA，硫代磷酸寡核苷酸(sDNA)，肽核酸(PNA)等，这些寡核苷酸虽然有各自的特点，但也都存在某种不足，如稳定性差、不能耐受核酸酶的降解、血浆蛋白结合率高等，从而限制了其应用。Morpholino寡核苷酸是一种人工合成的寡核苷酸类似物，与sDNA，PNA等其它寡核苷酸相比，具有稳定性好、 ＄。fkL＃4＋q4WA一特异性高、结合稳定、血浆蛋白结合率低等特点。除了作为反义探针在基因研究中得到应用外，作为放射性核素的载体，Morpholino寡核昔酸己经被应用于预定位肿瘤显像，并取得预期的结果。由于其良好的稳定性及药代动力学性质，被认为是潜在的肿瘤放射性诊断及治疗药物。 mY及’册Re均为目前应用较多的治疗性核素，二者均具有合适的半衰朋及 p射线能量。由于卯Y jJ纯 p发射体，探测较为困难，因此常与化学性质相似的’‘’In联合应用，利用”’In yJ Y射线观察肿瘤的摄取及计算辐射剂量。”汝e在释放2．11＊eV的p射线的同时，还同时释放适合显像的155KeV的Y射线（占15％L 而且’％Re可以很方便地通过’册W／’肌Re发生器得到，在应用上具有独特的优势。 目前标记寡核各酸多采取间接标记法，DOTA及MAG3被认为是目前较好的双功能螫合剂。与＊＊砒相比，＊OTA与二价及三价的金属离于”’In、卯Y等结合后具有较高的稳定性，可以避免放射性核素的脱落对正常组织造成的损伤。MAG。己经被广泛应用在””To标记抗体、多肽等生物分于，并且在标记寡核昔酸中也得到应用。 本课题以 DOTA及 MAG3做为双功能螫合剂，分别用”‘In／’Y／皿奴e和的”To四种放射性核素标记Morpholino寡核昔酸，检测标记物的稳定性及生物活性，并探讨其在正常小鼠的生物分布，为Morpholino寡核昔酸在预定位治疗中的应用做准备。材料与方法 长度为25个碱基的单链Morpholino寡核昔酸，通过3’末端的氨基分别与双功能螫合剂DOTA或MAG3耦联。通过对不同标记条件下结果的分析，确定上述四种核素的最佳标记条件／’Y的标记完全按照”‘In的标记条件进行，‘％Re的标记则在参考的”v的标记条件下，进行了较大的忧化。四种核素标记完成后，用高效液相色谱及即时簿层层析检测其室温下在生理盐水及 3 7”C在新鲜人血清中的稳定性。利用与高分子聚合物交联的互补链Morpholino检测其分于杂交活性，并了解其在正常鼠的生物分布及药代动力学特性。 4 ＄。14k＃4＋qtfL一结 果1．HPLC、ITLC及 CI 反相柱分析证实，Mofpholinos寡核昔酸可以与 双功自螫合齐DO“及MAG3耦联，并被”’Ill、”Y、’‘’RC、和””’兀 四种放射性核素成功标记。2．上述四种核素标记物在HPLC放射性图谱上均表现为锐利的单峰，在 加入与高分子聚合物交联的互补链Morpholino后，放射性前移到高分 子位置。3．HPI。C证实，’‘’In和”’”To标记的MORF在生理盐水及新鲜人血清中 72h保持稳定。4．卯Y标记的MORF在HPLC上出现随时间增加的低分子量放射性峰， 证实为p射线所导致的标记物辐射分解。5．“SRe标记物在 HPLC上的放射性回收率随时间增加而降低，初步确定 为氧化作用所导致的’‘妆e脱落。6．耦联外源性螫合基团及标记不同种类的核素，对MORF的分于杂交活 性无影响。7，生物分布显示，放射性标记的MORF主要通过肾脏排泄。8．除’％Re在胃及甲状腺中分布较高外，四种标记物的生物分布无显著差 异。结 论1．末端经氨基修饰的MOgr可以通过耦联外源性螫合基团被多种核素标 记。2．化学修饰及放射性标记对MORF分于的稳定性和生物活性无影响。3．对于叨Y和’‘’Re标记MORF，在注射前应采用适当方法避免辐射分解 和氧化作用所导致的稳大性下降。4．四种标记物的生物分布无显著差异，化学修饰剂及放射性标记对生物 5 第。军医人甘傅士香位讼式 分布无影响，螫合剂对药代动力学有一定的影响。5．本实验所采用的标记方法适合诊断及治疗性核素标记Morpholino寡核 昔酸，为继后的预定位治疗提供了放射性药物的实验基础。