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奶山羊乳房炎常发生于泌乳期,在产前及干乳期有时也发生此病,目前我国奶山羊隐性乳房炎的检出率较高,不仅会降低乳产量和乳质量,造成严重的经济损失,还会直接影响奶山羊的泌乳机能,甚至造成羊只死亡,是对奶山羊养殖业危害最严重的疫病之一。传统的抗生素疗法,不仅造成耐药菌株的大量产生,同时还带来严重的食品安全隐患,利用疫苗防治奶山羊乳房炎不仅有助于降低乳腺感染程度,还可控制亚临床乳房炎。佐剂是疫苗的关键组成部分,通过合理有效安全的使用免疫佐剂,可以增强抗原的免疫原性,促进免疫应答,增强宿主对抗原的保护性应答。本研究以我国奶山羊隐性乳房炎的主要病原菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌为材料,进行了奶山羊乳房炎灭活疫苗的研制、灭活苗佐剂筛选和免疫效果评估等研究。研究内容和结果如下:1.奶山羊乳房炎灭活疫苗的制备及其免疫效果评估本研究以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌为材料,经甲醛37℃灭活,按照6:1(V/V)与铝胶盐充分混匀,分别经腹股沟皮下、颈部皮下注射途径免疫71只泌乳期奶山羊,免疫剂量均为2mL。共免疫2次,每次间隔14d。分别在免疫前及第一次免疫后的第10d、24d、60d、180d采集血样和乳样,ELISA测定抗体效价,用快速诊断液检测隐性乳房炎,统计患病奶山羊的数量。结果显示,与对照组相比,两次免疫后血液及乳汁中针对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌的抗体效价水平均显著增加(P<0.05),抗体可维持60天;奶山羊经疫苗免疫后,持续进行隐性乳房炎的检测,颈部皮下免疫组直到免疫后第180d,腹股沟皮下免疫组直到免疫后的第60d,隐性乳房炎奶山羊数量均明显下降。结果表明,本研究制备的奶山羊乳房炎菌苗不仅能够刺激机体产生较好的体液免疫应答,而且还对隐性乳房炎有显著的治疗效果。2.三种佐剂对乳房炎灭活疫苗免疫效果的影响将灭活的菌泥分别与铝胶盐、蜂胶和转移因子混合,制备铝胶盐佐剂疫苗、蜂胶佐剂疫苗和转移因子佐剂疫苗共免疫102只泌乳期奶山羊,免疫剂量为2mL,免疫部位为颈部皮下免疫。共免疫2次,免疫间隔14d。分别在免疫前及每次免疫后的第10d采集血样和乳样,ELISA测定抗体效价,快速诊断液检测隐性乳房炎。结果显示,铝胶盐佐剂疫苗刺激机体产生的抗体水平在首免和二免后均显著高于对照组(P<0.05);三个免疫组中,铝胶盐组抗体水平最高,转移因子组次之,蜂胶组则不显著;铝胶盐佐剂疫苗还能显著降低隐性乳房炎的检出率,使隐性乳房炎检出率由免疫前的60%下降至二免后的30%。结果表明,同蜂胶和转移因子相比,铝胶盐佐剂能刺激机体产生更强的体液免疫应答,对隐性乳房炎的治疗效果更显著。结论:1.本研究制备的奶山羊乳房炎菌苗不仅能够刺激机体产生较好的体液免疫应答,而且还对隐性乳房炎有显著的治疗效果。2.所制备的乳房炎灭活疫苗经颈部皮下免疫时,可显著降低隐性乳房炎的检出率。3.同转移因子和蜂胶佐剂相比,铝胶盐佐剂乳房炎灭活苗免疫奶山羊后能显著增加机体针对各病原菌的抗体水平,降低隐性乳房炎的检出率。