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目的:通过建立稳定表达整合素连接激酶（integrin-linked kinase,ILK）特异性miRNA（MicroRNA, miRNA）的人膀胱癌BIU-87细胞株,研究miRNA沉默ILK基因对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的影响。方法:1.将针对ILK的4对特异性干扰序列和1对阴性对照序列分别构建到真核表达载体上: pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-ILK-1,2,3,4（ miR-ILK-1,2,3,4 ）和pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-ILK-neg（miR-ILK-neg）,均转染到膀胱癌BIU-87细胞,经杀稻瘟菌素持续压力筛选和有限稀释法培养获得稳定转染细胞株。2.通过RT-PCR及Western blot检测膀胱癌BIU-87稳定转染细胞株ILK mRNA和蛋白的抑制效率。3.选择抑制效率最高的稳定转染细胞组和未转染的细胞组作为研究对象,以流式细胞术检测细胞的周期分布,MTT法检测细胞增殖能力的改变,以及裸鼠皮下成瘤实验检测细胞在体内生长增殖的影响。结果:1.获得稳定表达miR-ILK-1,2,3,4和miR-ILK-neg的BIU-87细胞株。2.人膀胱癌BIU-87细胞稳定转染miR-ILK-1,2,3,4后,ILK mRNA和蛋白表达均明显受抑制（P<0.05）,以miR-ILK-3干扰质粒的抑制效率最高,分别为:84.6%和75.5%。而稳定转染miR-ILK-neg的细胞ILK mRNA和蛋白表达则抑制不明显（P>0.05）。3.流式细胞术检测细胞周期发现:转染组G0/G1期细胞所占比例为67.22±2.29%,S期为9.98±0.85%;未转染组分别为:49.67±1.57%和32.68±1.18%。转染组与未转染组相比,G0/G1期细胞比例明显增多,而S期明显减少（P<0.05）。MTT法检测细胞增殖发现:转染组细胞较未转染组细胞增殖明显减慢（P<0.05）。裸鼠皮下成瘤检测发现:转染组和未转染组细胞形成的瘤体体积分别为为:56.67±4.32 mm3和289.56±36.49 mm3 ,（P<0.05）,瘤体重量分别为:0.518±0.03 g和1.265±0.02 g,（P<0.05）。结论:pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-ILK重组质粒可有效沉默BIU-87细胞ILK mRNA和蛋白表达,从而明显抑制细胞增殖。