论文部分内容阅读
抑制消减杂交技术(Suppression Subtractive Hybridizition,SSH)是以抑制PCR为基础的一种高效寻找差异表达基因的新方法,而通城猪和大白猪是各具优点,具有代表性的中外猪种,本文以SSH筛选两品种猪基因组差异,旨在寻找导致这两个品种猪性状表现差异不同的分子遗传基础,从而为猪的育种提供一条新的途径和方法。 本实验共得到如下结果: 1.建立了在猪中运用SSH进行分子生物学研究的方法。本课题率先在国内将SSH运用于猪的分子生物学研究,并得到了经初步鉴定的差异片段。 2.扩增得到基因组差异条带。通过对基因组酶切产物加接头,两次杂交后,进行两次扩增,得到两品种猪基因组差异条带。 3.克隆扩增产物建立了消减文库。将第二次PCR产物插入pGE-T Easy Vector得到消减文库。 4.初步鉴定了一些插入片段:通过EcoR Ⅰ酶切,得到400~600bp的插入片段,对酶切产物进行PCR扩增。得到与酶切的插入片段大小相近的扩增片段。 5.点杂交鉴定了一些差异片段。 6.本研究认为SSH可以在猪的分子生物学研究中得到很好应用。本课题所得到的结果,还有待进一步鉴定。得到差异片段后寻找差异基因、差异基因的功能及其在生产中的应用还有待进一步研究。