目的根据已知的黄褐斑病理生理,通过研究a-MSH体外对小鼠B16黑素瘤细胞细胞生物学的影响,明确a-MSH影响小鼠B16黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性、黑素生成的时效关系和量效关系,建立针对具有治疗黄褐斑开发前景药物的体外药效学模型。通过实验研究,明确中药提取物甘草黄酮对黄褐斑可能产生美白作用的最佳剂量。方法一、a-MSH(?)勺实验：实验室培养小鼠B16黑素瘤细胞,以空白组为对照组,用1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml、1000ng/m1四个浓度的a-MSH作培养基,对细胞进行干预。分别采用MTT法、NaOH裂解法和多巴氧化法来检测黑素瘤细胞细胞增殖、黑素瘤细胞合成黑素及酪氨酸酶活性情况。二、甘草黄酮药物毒性范围内的最佳剂量实验：配置甘草黄酮四种不同浓度62.5ug/ml.125ug/ml、250ug/ml、500ug/ml作用于a-MSH的最佳培养模型,采用以上同样方法检测黑素瘤细胞细胞增殖、黑素瘤细胞合成黑素及酪氨酸酶活性情况。结果一、a-MSH的实验：四种剂量都能促进细胞的增殖,且10ng/ml时达最佳值,浓度为1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml(?)促进黑色的合成,浓度为10ng/ml时达最佳值,浓度为1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml时能促进酪氨酸酶活性且浓度10ng/m1为最佳值。浓度为10ng/ml培养的细胞达到最佳值,三个时间段之间的比较在统计学上不存在明显的差异。二、甘草黄酮药物毒性范围内的最佳剂量实验：甘草黄酮四种剂量中,250ug/m1指标效果最好,500ug/ml时由于细胞毒性,未测出。结论a-MSH能直接影响小鼠B16黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素的生成。甘草黄酮对酪氨酸酶活性有很好的抑制效果,可用于黄褐斑病治疗。