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本文从三部分进行分述,第一部分对“阴阳日钟调节法”的理论源流进行溯源回顾,将《黄帝内经》中有关“天人相应”思维的篇章进行归纳整理。第二部分为实验一,探讨全光谱卤素灯延时照射对兔眼发育的影响,以血清多巴胺、视网膜多巴胺及生物钟基因Cry表达作为指标,探讨影响机制及中药干预机制。第三部分为实验二,探讨全光谱卤素灯延时照射对兔视蛋白表达及视网膜超微结构的影响,探讨中药的干预作用。下面对两部分实验内容分述:实验一目的:探讨全光谱卤素灯延时照射对兔眼球发育影响及中药干预机制。方法:实验选取4周龄新西兰白兔54只,随机分为3组,分别为自然光组、全光谱组及全光谱中药组。自然光组置于南面窗旁约1米,全光谱组及全光谱中药组放置在石英卤素灯架前约60cm处,确保实验期间无其他干扰光源,人工光源组以定时器设定每日06:00开始照明,23:59关闭照明。中药组予以“日钟阳方”每日10:00灌胃,予以“日钟阴方”每日22:00灌胃。实验共进行12周。分别于实验第4周、8周及12周测量眼轴长度,并同期采集各组兔视网膜,采用蛋白免疫印迹法分别检测各样本Cry1及Cry2蛋白相对含量,采用RT-PCR技术分别检测Cry1 mRNA及Cry2 mRNA表达,于实验第4周及12周利用酶联免疫法测定各血清样本多巴胺含量,使用高效液相色谱分析各视网膜样本多巴胺含量。结果:眼轴:实验第4周、8周时,全光谱组兔眼轴比自然光组及全光谱中药组眼轴长,差异有统计学意义(P<0.05),实验第12周时,全光谱组比其他两组眼轴长,但差异无统计学意义(P>0.05)。血清多巴胺:实验第4周、12周,自然光组及全光谱中药组高于全光谱组,但差异无统计学意义(P>0.05)。视网膜多巴胺:实验第4周、12周,全光谱组含量较自然光组及全光谱中药组减少,与自然光组比较差异有极显著性统计学意义(P<0.000),与全光谱中药组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Cry1蛋白相对定量:实验第4周、8周及12周,全光谱组兔视网膜Cry1蛋白表达较自然光组及中药组下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。Cry2蛋白相对定量:实验第4周及12周,全光谱组视网膜Cry2蛋白表达低于自然光组及全光谱中药组,差异均有极显著意义(P<0.000);实验第8周,全光谱组视网膜Cry2蛋白表达高于自然光组及全光谱中药组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Cry1 mRNA表达:实验第4周、8周及12周时,全光谱组视网膜Cry1 mRNA表达低于自然光组及全光谱中药组,差异均有极显著性(P<0.000)。Cry2 mRNA表达:实验第4周、8周及12周,全光谱组视网膜Cry2 mRNA表达低于自然光组及全光谱中药组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:1.全光谱卤素灯延时照射可能会在一定程度上造成兔眼轴加快向近视化发育,这可能与降低视网膜多巴胺水平有关。2.延时照射能造成兔视网膜生物钟转录调节因子Cry表达紊乱。3.中药对全光谱卤素灯延时照射造成的近视化加快有一定抑制作用,与其能促进视网膜多巴胺的释放有关。4.“日钟阴阳方”对Cry紊乱有一定调整作用。实验二目的:探讨全光谱卤素灯延时照射下兔视蛋白表达的差异和视网膜超微结构改变,以及中药干预的作用。方法:实验选取4周龄新西兰白兔54只,随机分为自然组、全光谱组及全光谱中药组,实验光环境设置及中药给予方法于实验一相同。实验共进行12周。分别于实验第4周及12周采集各组兔视网膜,利用蛋白免疫印迹法分别检测各样本长波敏感视蛋白(L-opsin)、绿敏视蛋白(M-opsin)及短波敏感视蛋白(S-opsin)相对含量,采用RT-PCR技术分别检测上述三种视蛋白mRNA表达。于实验第4周、8周及12周采取兔视网膜行电镜检查。结果:视蛋白及mRNA表达:实验第4周及12周,全光谱组L-opsin及M-opsin表达低于自然光组及全光谱中药组,且差异有统计学性意义(P<0.05),第4周全光谱组S-opsin表达高于自然光组,低于全光谱中药组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验第4周及12周,全光谱组三种视蛋白mRNA表达均低于其他两组,除第12周时与全光谱中药组比较无统计学意义以外,其他均有统计学意义(P<0.05)。电镜结果:实验第4周时,三组均未见明显病理变化,实验第8周时,全光谱组视网膜色素上皮细胞朝光感受器面微绒毛减少,胞浆内见较大的脂滴,部分内节椭圆体内线粒体数量减少,光感受器细胞间偶见大的空泡,全光谱中药组光感受器外节膜盘结构正常,偶见膜盘内空泡,部分内节椭圆体内线粒体排列疏松,数量减少。实验第12周时,全光谱组视网膜各层结构不清,仅见个别残留的光感受器外节膜盘和最外层的巩膜结构,全光谱中药组外节膜盘结构疏松,内节椭圆体内线粒体数量减少。结论:1.全光谱卤素灯下生长的新西兰白兔早期L-opsin及M-opsin表达低于自然光下生长的白兔,S-opsin表达则是前者高于后者,后期全光谱卤素灯下生长的兔三种视蛋白均显著低于自然光下生长的兔。2.短期内全光谱卤素灯照射对视网膜超微结构无明显损害,但长期照射表现出对视网膜结构的损害。3.“日钟阴阳方”对全光谱卤素灯环境下生长的兔三种视蛋白均有一定的上调表达作用,对长期延时照射造成的视网膜损害有一定保护作用。