近几年，以DNA为模板合成的银纳米簇（DNA-AgNCs）在生物传感及成像领域吸引了越来越多科学家的关注。由于量子产率高、抗光漂白性强及细胞毒性低等优点，DNA-AgNCs已经被广泛应用于生物传感器的设计中，在生物标记及生物成像中也有较多的应用。末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）是一种特殊的DNA聚合酶。由于其不需要模板的性质，TdT在核酸标记上已有较多的应用。本文基于末端脱氧核苷酸转移酶的扩增，开发出一种新型的DNA-AgNCs合成方法，并将其应用于核酸酶的活性检测及蛋白质的分析中。具体如下：1.利用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）催化扩增单链DNA的性质，构建了一种新型合成DNA-AgNCs的方法。通过TdT在一条不能够用作DNA-AgNCs合成模板的DNA的3’-OH端扩增出一段富含胞嘧啶（C）的DNA序列，然后利用该扩增的富C序列成功地合成出了具有荧光性质的DNA-AgNCs。另外，我们考察了会影响TdT扩增及DNA-AgNCs合成的几个因素。我们还把以TdT的扩增产物DNA-P-Cn作为模板合成的DNA-AgNCs与几条人工合成的短链富C序列作对比，发现以DNA-P-Cn为模板的DNA-AgNCs的荧光强度要高很多。接着，利用透射电子显微镜（TEM）及其附件X射线能谱分析仪（EDS）来对DNA-AgNCs进行表征。结合TEM的结果，我们推断长链模板合成的DNA-AgNCs荧光更强的原因是因为：1.长链序列移除AgNCs表面的极性溶剂，更好地保护AgNCs；2.AgNC之间存在荧光共振能量转移（FRET）现象。2.基于新型DNA-AgNCs合成方法，我们开发出了一种末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）的活性分析方法。该方法获得的检测限（0.0318U）比早前关于TdT活性检测的报道中的低200倍左右，实现了无标记、高灵敏地对TdT酶活进行―turn-on‖检测。同时，该方法具有比较稳定的重现性，在实际样品中的添加回收实验也取得令人满意的结果。最后，我们分析了TdT的几种常见抑制剂（焦磷酸钠、金精三羧酸和三磷酸腺苷）的抑制效果。3.基于TdT对随机底物的扩增及DNA-AgNCs的合成，我们开发出一种具有普适性的核酸酶“turn-on”检测方法。我们选取限制性内切酶及3’-5’核酸外切酶的典型代表——EcoRI和ExoIII作为目标分析物。实验得出，EcoRI的检测限为0.0629U，ExoIII的检测限为0.00867U，均比相关文献中报道的要低。此外，对两种酶检测的信背比（S/B）分别为30.3及103.2。因此该方法具有很高的灵敏度。由于核酸酶对底物的特异性而具有很好的选择性。此外，该方法只需要对DNA底物稍作改动，就可以应用于切刻酶、DNA连接酶、甲基化酶及碱性磷酸酶等DNA相关酶类的活性分析中。4.基于凝血酶的核酸适体及切刻酶Nb.BbvCI，我们把新型DNA-AgNCs合成方法应用于凝血酶的“turn-on”放大检测。通过合理地设计实验中涉及的两条DNA探针——一条核酸适体探针及一条扩增探针，我们实现了高灵敏度地检测痕量凝血酶，检测限达到0.043nM。另外，由于核酸适体对目标分析物的特异性，该方法还具有很好的选择性。只要把凝血酶的核酸适体换成其他蛋白或小分子对应的核酸适体，便能实现对其他更广泛的目标分析物的分析检测。