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实验目的:血管性痴呆(Vascular Dementia,VD)是老年人群中经常遇到的疾病,是仅次于阿尔兹海默病的第二大痴呆类型疾病。目前尚无关于我国的传统药物续断(Dipsacus asperoides)对血管性痴呆的治疗研究报道。此课题通过建立血管性痴呆模型,给予续断提取物,探究其间可能蕴含的作用机制,也为中药续断的利用及进一步开发、临床应用提供实验基础上的理论依据。实验方法:选取正常成年雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、模型组、以及续断提取物低、中、高剂量组,10只每组。利用反复夹闭、再通双侧颈总动脉,同时腹腔注射硝普钠建立大鼠血管性痴呆模型。续断提取物低中高剂量组按照15mg/kg、45mg/kg和135mg/kg剂量灌胃给药于大鼠,假手术组和模型组大鼠灌以等同容量的蒸馏水。给药28d后,观察其对大鼠一般状态的影响,利用Morris水迷宫对各组SD大鼠的认知学习功能予以检测与分析,对各组大鼠海马CA1区应用HE染色后进行形态学观察,并用Western blot法对大鼠海马内Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达量进行测定,利用酶联免疫法(ELASA)对各组海马血清中SOD活力、MDA,以及GSH-Px含量进行测定。实验结果:1.续断提取物对大鼠一般状态的影响实验期间,全部SD大鼠的一般状态都良好。6组SD大鼠的食物摄取量、大小便、皮毛、精神状况等都正常。实验结束后,各组动物均进行解剖,肉眼观察肾、脾、心、胃肠、肝和肺等脏器,均未发现明显异常。说明续断提取物不会导致实质性脏器的大体病理损伤。2.续断提取物对血管性痴呆大鼠认知学习能力的影响对寻找站台潜伏期的影响随着训练天数的增加,各组大鼠的寻找站台潜伏期都下降,第一天和第二天各组大鼠寻找站台的时间没有明显的差异,但是从第三天开始,假手术组以及正常组大鼠寻找站台潜伏期与模型组相比缩短(P<0.05),续断提取物高剂量和中剂量组大鼠寻找站台潜伏期明显低于模型组大鼠(P<0.05)。对穿越站台次数的影响撤走站台后,模型组大鼠穿越站台次数明显少于正常组和假手术组(P<0.05),而续断提取物高、中剂量组大鼠穿越站台次数明显高于模型组(P<0.05)。3.续断提取物对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元形态的影响通过观察发现,进行HE染色后的正常组SD大鼠和假手术组SD大鼠海马CA1区神经元的结构正常,神经元的形态完整,神经元的排列紧密有序,神经元的数目较多,胞质较多,核仁清晰,核、质界限清楚。而模型组SD大鼠的海马CA1区的神经元的结构异常,形态欠完整,排列稀疏欠规整,数目显著降低,细胞质欠缺,核、质界限不清,呈现各种方向排列的三角形态或不规则形态。而续断提取物高剂量组和中剂量组SD大鼠海马CA1区神经元的结构与其相比而言相对正常,神经元的形态较为完整,神经元的排列较为紧密有序,核、质界限较为清楚,高剂量组神经元的结构、形态、排列及核、质的界限、数目等更加接近于假手术组,而中剂量和低剂量次之。4.续断提取物对血管性痴呆大鼠海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响正常组与假手术组大鼠海马内Bcl-2与Bax蛋白表达量较少,而模型组内这两种蛋白表达量均明显上升(P<0.05)。高、中剂量组大鼠海马内Bcl-2蛋白表达量高于模型组,Bax蛋白表达量低于模型组,且具有统计学意义(P<0.05)。正常组与假手术组大鼠海马内Bcl-2与Bax蛋白表达量基本一致,而模型组的二者比值明显下降,海马内Bax蛋白表达明显增加、并且多于Bcl-2蛋白,而高、中剂量组大鼠海马内Bcl-2蛋白表达量高于Bax表达量。5.续断提取物对血管性痴呆大鼠血清中SOD活力、MDA和GSH-Px含量的影响续断提取物高剂量组与中剂量组大鼠血液中SOD活力、GSH-Px含量明显高于模型组(P<0.05)。同时发现高剂量组与中剂量组大鼠血液中MDA亦明显低于对照组(P<0.05),而正常组与假手术相比无明显差异(P<0.05)。结论:1.续断提取物能够明显改善血管性痴呆大鼠认知学习记忆障碍;2.续断提取物可能通过调节bcl-2、bax蛋白表达和提高体内清除代谢过程中所产生的自由基能力,从而对海马神经元起到一定的保护作用