论文部分内容阅读
马铃薯(Solanum tuberosum L.)是现今人类社会的第三大粮食作物,仅次于水稻和小麦。由于马铃薯普通四倍体栽培种基因库贫乏,导致其遗传背景相对狭窄,因此利用双单倍体与野生二倍体马铃薯进行杂交育种越来越受到重视。诱导四倍体栽培种孤雌生殖是获得马铃薯双单倍体的有效方法。因此本研究目的在于通过孤雌生殖诱导产生马铃薯双单倍体,利用双单倍体与二倍体野生种马铃薯杂交,将野生种马铃薯中优良基因进行转移到栽培种中,为马铃薯种质资源创新提供一个途径。本试验用3个授粉材料为诱导父本材料,8个马铃薯栽培种为母本,通过马铃薯孤雌生殖诱导,获得双单倍体,研究了孤雌生殖诱导的影响因素。主要研究结果如下:1、测定3个诱导材料花粉活力,确定最适的授粉时间。PHU035与IVP101的花粉在采摘后5d内使用,而PHU1.22的花粉因为初始活力低,应尽早使用。2、研究了诱导材料、母本和环境因素对孤雌生殖座果率的影响。其中天薯10号与夏波蒂人工授粉获得的座果率最高,分别为17.5%与17.09%。青薯9号与青薯2号的座果率最低,只有8.57%与7.08%。分析发现孤雌生殖诱导试验最适合的环境条件为温度在21℃左右,湿度在82%-85%的范围内。3、利用胚斑标记基因、SSR分子标记方法和根尖细胞染色体计数3种方法对马铃薯双单倍体进行鉴定。共诱导成功9个双单倍体。其中,胚斑标记基因鉴定无胚斑种子的产生率为17.25%,SSR分子标记方法和染色体计数法均可以鉴定出双单倍体。综合比较鉴定准确率,胚斑标记基因法结合SSR分子标记技术可以快速准确地鉴定出双单倍体。4、通过对不同诱导材料和不同母本诱导率的分析,结果表明:3个诱导材料中,PHU035是最优良的授粉材料;8个四倍体栽培种中,天薯10号和夏波蒂的结实率与诱导率均较高,适合做孤雌生殖诱导的母本材料。