弓形虫病(toxoplasmosis)是一种由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的人兽共患寄生虫病,可以感染人类、哺乳动物、鸟类和冷血动物等,呈世界性分布,严重危害人体健康,并给全球的畜牧业造成很大的经济损失。食用生的或半生不熟的肉、蛋制品是人类感染弓形虫的一个主要途径,因此对畜禽弓形虫病的检测有着重要的公共卫生学意义。目前,国外对鸡的弓形虫感染流行病学调查较多,国内相关研究较少。调查的方法多采用抗体检测,很少涉及抗原检测。为了掌握我国鸡群弓形虫感染情况,本研究应用ELISA方法对我国13个省、市、自治区的散养鸡和部分笼养鸡进行了弓形虫感染情况调查,采集和分离了1266分血清样品置于-20℃保存备检,进行抗原、抗体的双项检测,二者有一项阳性即视为弓形虫阳性感染。调查结果发现,新疆维吾尔自治区散养鸡的阳性率为16.42%(11/67)；内蒙古自治区散养鸡阳性率为27.87%(17/61)；辽宁省散养鸡阳性率为20%(10/50)；山东省散养鸡阳性率为42.25%(30/71)；河南省散养鸡阳性率为20%(27/135)；江苏省散养鸡阳性率为47.27%(21/65)；安徽省散养鸡阳性率为6.67%(4/60)；四川省散养鸡阳性率为25.81%(24/93)；重庆市散养鸡阳性率为35.71%(30/84)；江西省散养鸡阳性率为39.64%(44/111)；福建省散养鸡阳性率为15.63%(10/64)；广西壮族自治区散养鸡阳性率为38.57%(54/140)；广东省散养鸡阳性率为26.39%(19/72)；河南省新乡市笼养鸡阳性率为2.15%(2/93)。结果表明我国散养鸡群中都存在较高的弓形虫感染,平均阳性率为26.97%,有的省份高达40%以上；而笼养鸡阳性率较低,可能与其饲养模式不与土壤接触有关。为了探索抗原、抗体水平与虫株分离的关系,本试验用不同剂量的RH株速殖子人工感染雏鸡,分为高(108个/只鸡)、中(106个／只鸡)、低(105个/只鸡)3个剂量组分别静脉注射5、20、20只两周龄雏鸡。试验结果：高剂量组1天后5只鸡全部死亡,取心、脑等组织处理后接种小鼠,能分离到弓形虫。中剂量组和低剂量组均不能引起雏鸡发病,在攻虫后第4天抗原检测为阳性、抗体检测为阴性时,2个剂量组各取5只抗原检测呈阳性的鸡剖杀,取心、脑等组织处理接种小鼠后能够分离到弓形虫；在攻虫后第10天抗原抗体检测均为阳性时,两个剂量组中各取5只抗原抗体呈阳性的鸡剖杀,取心、脑等组织处理接种小鼠后能够分离到弓形虫；在攻虫后第21天抗原检测为阴性、抗体检测为阳性时,两个剂量组各取5只抗体检测呈阳性的鸡剖杀,取心脑等组织用胃蛋白酶消化后接种小鼠,经三代盲传未分离到弓形虫；在攻虫后第33天抗原抗体都为阴性时,将剩余鸡全部剖杀,取心、脑等组织用胃蛋白酶消化,接种小鼠,经三代盲传未分离到弓形虫。对江苏某地100只散养鸡采集血清进行弓形虫抗原抗体检测,收集到21只抗体检测呈阳性鸡用于弓形虫株的分离。将抗体阳性动物的组织用盐酸-胃蛋白酶溶液消化处理,制作组织悬液腹腔接种小白鼠分离弓形虫株。10天后将无症状小鼠剖杀制作组织悬液进行盲传,此后每周盲传1代。3号鸡所攻小鼠在盲传至第三代第4天时出现症状,腹水中见到大量弓形虫速殖子,小鼠于第6天死亡。后经在小鼠中传代扩增,成功分离出鸡源弓形虫株,为后续研究奠定基础。