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昆虫天生免疫包含细胞免疫和体液免疫。血细胞是细胞免疫的参与执行者,也是许多体液免疫因子的分泌者。因为哺乳动物的白血球与果蝇的血细胞的发育调控上有许多相似性,昆虫造血的研究一直是发育生物学领域的热点话题。造血器官中血细胞的增殖、分化、释放、成熟过程以及造血的调节因素、信号传导的机制等都有待于探索揭示。
目前还不清楚血细胞释放进入血淋巴中是否需要一个成熟的过程,使它们功能上变得完备。昆虫造血器官(HPO)组织培养系统的建立使我们可以进行新释放(NE)血细胞的生理功能的研究。我们建立了家蚕pigmented and non-diapausing egg,stripedmutant(pnd pS)品系造血器官体外培养系统,然后研究了新释放血细胞的生理功能。发现在格雷氏完全培养基里添加10%热灭活的蚕血清(SP)比添加FBS更适合pndPS造血器官的培养。NE血细胞吞噬了碘化丙碇(PI)标记的细菌,并且能够包囊化Immulectin-2覆盖的镍质珠子和蛹的组织碎片。说明这个培养系统可以产生有吞噬和包囊化功能的血细胞。这些血细胞可以用于血细胞免疫反应机制的研究。
我们又在建立的家蚕造血器官体外培养系统的基础上,研究了2种蜕皮激素ecdysone(蜕皮酮)和20-hydroxyecdysone(20E)以及保幼激素类似物methoprene对体外培养的家蚕HPO造血功能的调节作用。结果添加O.005~0.5μg/mL20E可促进5龄2天幼虫(V-2)HPO的血细胞增殖和释放,但会抑制游走期0天(W-0)HPO的血细胞增殖和释放;添加低浓度(O.0365μg/mL)蜕皮酮可以促进V-2和W-O期HPO的血细胞增殖及释放,高浓度(0.365~3.65μg/mL)蜕皮酮对血细胞增殖无促进作用,但有促进血细胞释放作用;低浓度(2μg/mL)methoprene不会阻止HPO的血细胞增殖,但抑制血细胞的释放;高浓度(20~200μg/mL)methoprene可抑制HPO的血细胞增殖和释放;O.0365μg/mL蜕皮酮与2μg/mLmethoprene共同处理时,蜕皮酮可以掩盖methoprene抑制血细胞释放的作用。结果表明,蜕皮酮和20E对家蚕HPO造血功能起促进作用,而methoprene起抑制作用,蜕皮酮和methoprene的作用在一定程度上相互拮抗。