论文部分内容阅读
目的:应用高效液相色谱法测定丹参注射液五种水溶性成分丹参素(DSS)、原儿茶酸(ACID)、原儿茶醛(PAL)、丹酚酸B(SAB)和丹酚酸A(SAA)在动物血浆中的含量,并研究多组分药代动力学。方法:应用高效液相色谱法(HPLC)测定血浆样品中DSS、ACID、PAL、SAB和SAA的浓度。色谱条件如下:色谱柱CAP CELL PAK C18 UG120 (4.6mm×250mm,5μm);紫外检测波长:281nm;流动相为A、B梯度洗脱系统,A:水-二甲基甲酰胺-冰醋酸(体积比:4:4:2), B:甲醇-二甲基甲酰胺-冰醋酸(体积比:4:4:2);流速1.0ml/min。血药浓度-时间数据按3P97软件拟合房室模型并计算药代动力学参数。结果:⑴方法学的考查表明,本文建立的HPLC测定方法准确可靠,操作简便快捷,一次进样即可得到五种组分的含量测定结果。方法特异性强,灵敏度高。血浆标准曲线分别在50～8000ng/ml(ACID、PAL)、100～8000ng/ml(DSS、SAB)、200～8000ng/ml(SAA)之间有良好线性关系,最低定量限分别为50ng/ml(ACID、PAL)、100ng/ml(DSS、SAB)和200ng/ml(SAA),日内及日间精密度RSD均小于9.9%。DSS、ACID、PAL、SAB、SAA的回收率分别为98.8%～99.7%、98.9%～99.7%、98%～99.7%、98.3%～99.1%、102.9%～104.8%。⑵家兔耳缘静脉注射丹参注射液2.5ml/kg(含DSS 30.00mg/kg、ACID 2.25mg/kg、PAL 26.00mg/kg、SAB 5.50mg/kg、SAA 1.50mg/kg)、1.25ml/kg(含DSS 15.000mg/kg、ACID 1.125mg/kg、PAL 13.000mg/kg、SAB 2.750mg/kg、SAA 0.750mg/kg)、0.625 ml/kg(含DSS 7.500mg/kg、ACID 0.562mg/kg、PAL 6.500mg/kg、SAB 1.375mg/kg、SAA 0.375mg/kg),DSS、ACID、PAL、SAB、SAA的药代动力学行为符合开放性二室模型一级动力学过程,主要动力学参数分别为:消除半衰期(t1/2β)为124.12～137.72min、51.72～56.38min、112.30～115.43min、125.61～140.66min、152.62～167.32min,清除率( CL)为5.4252～5.7760ml/kg/min、18.2716～23.2757ml/kg/min、125.3682～150.8414ml/kg/min、15.0609～17.4459ml/kg/min、1.4206～1.5826ml/kg/min,表观分布容积(Vd)为106.47～203.21ml/kg、295.84～340.14ml/kg、9171.2～10193.6ml/kg、236.29～388.55ml/kg、44.39～49.73ml/kg,三种给药剂量主要动力学参数相似,经统计学检验无显著性差异(P>0.05),AUC与剂量呈正相关。⑶大鼠静脉注射(iv)丹参注射液2.5ml/kg,DSS、ACID、PAL、SAB、SAA消除半衰期(t1/2β)分别为125.73min、55.92min、157.42min、112.82min、199.49min,药-时曲线下面积(AUC)分别为4999.44μg/ml·min、107.86μg/ml·min、141.24μg/ml·min、451.33μg/ml·min、523.01μg/ml·min;大鼠肌肉注射丹参注射液2.5ml/kg,5种水溶性成分消除半衰期(t1/2Ke)分别为95.15min、56.10min、96.83min、77.91min、100.36min,药-时曲线下面积(AUC)分别为3234.06μg/ml·min、53.74μg/ml·min、71.59μg/ml·min、317.48μg/ml·min、298.04μg/ml·min。⑷以AUC数据算得丹参注射液中DSS、ACID、PAL、SAB、SAA的生物利用度分别为64.59%、49.83%、50.69%、70.34%、56.99%。结论:本文首次建立了同时测定血浆中丹参五种水溶性有效成分的方法。该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,能够用于丹参类注射液水溶性成分的药代动力学研究;家兔静脉注射丹参注射液的药代动力学行为符合开放性二室模型一级动力学过程,丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛、丹酚酸B、丹酚酸A五种成份在给药剂量范围内均为线性动力学。大鼠肌肉注射生物利用度高,作为给药途径有一定的意义。